 |
50. Применение экспериментальных животных в микробиологии.
|
|
|
|
50. Применение экспериментальных животных в микробиологии.
1. Используют:
1)для обнаружения вируса в ПМ
2)первичного выделения вируса из ПМ
3)накопления вирусной массы
4)поддержания вируса в лабе в активном сост.
5)титровании вируса
6)в качестве тест-объекта в РН
6)получение гипериммунных сывороток.
Использ. жив.: белые мыши, белые крысы, Мор. свинки Кролики
51. Стафилококки. Морфология, культивирование свойства. Факторы патогенности. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Иммунитет. Биопрепараты.
Патогенные стафилококки - вызывает гнойно-воспалительные процессы различной локализации: местные – фу-рункулы, абсцессы и др.; в отдельных органах – маститы, эндометриты и др.; общее поражение – пиемия и септицемия.
пищевые токсикозы (токсикоинфекции)
Классификация:
род: Staphylococcus
виды:
S. aureus - наиболее патогенный
S. epidermidis – наименее патогенный
S. saprophyticus – очень редко вызывает болезни.
Восприимчивы все виды животных, включая человека и птиц.
АГ: пептидогликан, тейхоевые к-ты, протеин A
Патогенез и факторы вирулентности:
проникает в организм через поврежденную кожу и слизистые оболочки;
энтеротоксины – с пищевыми продуктами (мясо, молоко и др. );
образуют и выделяют экзотоксины: гематоксин, лейкоцидин, энтеротоксин, некротоксин;
образуют и выделяют ферменты: коагулазу, фибринолизин, гиалуронидазу, ДНК-азу.
Методы диагностики
Бактериологический метод:
материал для исследования:
раневой экссудат, гной абсцессов, ран, молоко при маститах, выделение из половых органов при эндометритах, кровь при септицемии;
микроскопия:
|
|
|
методы окраски:
простой метод и по Граму;
микрокартина:
шаровидные клетки располагаются беспорядочно, диаметр 0, 5-1, 5 мкм;
грамположительные;
спор не образуют;
капсулу не образуют.
культивирование:
посев на питательные среды:
МПА, МПБ, МПА с 15% хлорида натрия, кровяной МПА.
особенности выделения чистой культуры:
факультативные анаэробы;
оптимальная температура 370C;
срок культивирования 18-20 часов.
культуральные свойства:
на МПА – колонии округлые, диаметром 2-5 мм, с ровным краем, могут быть окрашены в золотистый цвет (S. aureus), белый (S. epidermidis), лимонно-желтый (S. saprophyticus).
на жидких средах: на МПБ – равномерное помутнение с выпадением рыхлого хлопьевидного осадка.
биохимические свойства (ферментативная активность):
ферментация маннита без газа (в анаэробных условиях);
гемолиз на кровяных средах;
ДНК – азная активность;
Рост на элективных средах;
Плазмокоагуляция.
Биопроба для определения свойств:
летальных – на кроликах;
дерматонекротических – на кроликах;
токсических – на котятах
Серологическая и аллергическая диагностика:
в ветеринарии не используется
Антигенное строение; серотины; фаготипы
Патогенные и непатогенные стафилококки могут быть также дифференцированы с помощью реакции адсорбации. С помощью адсорбированных сывороток пиогенные стафилококки были разделены на 7 специфических типов и 8 типов с менее специфическими реакциями. Большое значение имеет метод фаготипажа стафилококков. С помощью специфических стафилококковых фагов стафилококки отнесены к различным фаготипам.
Метод фаготипирования позволяет выявить патогенность штаммов стафилококка. Для фагодиагностики стафилококков с помощью специфического фага, применяются фаги, принадлежащие к пяти группам. Основными фагами удается пикетировать до 60 % выделяемых бактерий, процент пикетируемых фагами стафилококков достигает 73, 7 %.
|
|
|
По степени патогенности и токсичности стафилококки могут быть разделены на 3 группы:
стафилококки первой группы дают значительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана в течение 1 - 2 ч. Стафилококков этой группы выделяют при фурункулезе, гидраденитах, остеомиелитах, флегмонах, сепсисе и при ряде других гнойных заболеваниях. Стафилококки, принадлежащие к первой группе считаются патогенными;
стафилококки второй группы вызывают незначительный гемолиз на 5 % кровяном агаре с кровью кролика и барана. Они считаются условно патогенными. Они встречаются часто на открытых поверхностях кожи, при фолликулитах, иногда на поверхности ран;
стафилококки третьей группы не вызывают гемолиза на 5 % кровяном агаре с кровью кролика или барана. Эти стафилококки следует считать сапрофитами, их часто выделяют с поверхности здоровой кожи, а также с различных предметов.
Для выделения стафилококков производят посев на чашку Петри с молочно-солевым агаром. Одновременно засевают чашки с 5 % кровяным агаром с кровью кролика или барана. Через 18 - 20 ч инкубации при 37 °С выросшие на чашках колонии микроскопируют, делают мазок и окрашивают по Граму. Колонии стафилококков затем пересевают на пробирки с питательной средой и помещают в термостат при 37 °С. Через 12 - 18 ч роста после микроскопирования мазков из выросшей культуры, окрашенных по Граму, ставят реакцию плазмокоагуляции, а из оставшейся культуры готовят взвесь и вводят кролику внутрикожно. Реакцию учитывают через 24 - 48 ч (появление некроза).
|
|
|
