Главная | Обратная связь
МегаЛекции

Общие методы количественного определения





1. Алкалиметрический метод (вариант нейтрализации) определения аминокислот, содержащих две карбоксильные группы. При правильном подборе индикатора данные соединения могут титроваться как одноосновные кислоты (карбоксильная группа – в γ-положении).

ФС ХII для кислоты глутаминовой (субстанция и таблетки). Алкалиметрия по бромтимоловому синему до перехода желтой окраски в голубовато-зеленую (рН 6,0 – 7,6) или нейтральному красному.

 

Кстех = 1/1; fэкв = 1,

то есть в реакции нейтрализуется одна карбоксильная группа

Для других АК метод возможен только в смешанных растворителях (в среде органических растворителей: диметилформамида, ацетона, этилового и пропилового спиртов). Органические растворители подавляют ионизацию аминогрупп, это позволяет титровать препараты аминокислот водными растворами натрия гидроксида. Индикатор – тимоловый синий

 

2. Метод Кьельдаля (классический вариант ГФ). Определение общего азота для всех аминокислот.

1 стадия. В колбу Кьельдаля помещают точную навеску вещества, добавляют концентрированную серную кислоту и смесь сульфата калия и сульфата меди (для увеличения Т°кипения), нагревают. Смесь кипятят до тех пор, пока раствор не просветлеет (станет светло-зеленым). и После этого продолжают сжигание (минерализацию) в течение 30 минут (для метионина 4-4,5 часа). Образуются неорганические соединения: вода, углекислый газ и сульфат аммония.

>t°

C→CO2; N→(NH4)2SO4→NH3

 

2 стадия. После этого к охлажденной смеси добавляют воду, подсоединяют колбу к парообразователю, добавляют избыток 30% гидроксида натрия (для нейтрализации H2SO4) и пропускают пар. Азот органического соединения, после минерализации его связанный серной кислотой в сульфат аммония, отгоняют с водяным паром количественно в виде аммиака в приемник с борной кислотой. Образуется смесь метабората и тетрабората аммония.

3 стадия. Смесь после полного окончания перегонки титруется 0,1М хлороводордной кислотой. Индикатор смешанный: метиловый красный и метиленовый синий 1:1 или м/о + м/с.



Параллельно проводят контрольный опыт.

Расчет может проводится двумя способами:

- на содержание азота в препарате в процентах, тогда всегда Э = А.м. Этот принцип расчета лежит в основе определения кислоты глутаминовой; согласно ФС, содержание азота в препарате должно быть не менее 9,4 и не более 9,55%.

- на содержание в препарате действующего вещества в процентах, тогда Э=М.м./n, где n – количество атомов азота, содержащихся в молекуле препарата.

 

3. Формольное титрование по Сёренсену (алкалиметрия после взаимодействия с формальдегидом). Для блокирования аминогруппы предварительно добавляют формальдегид, образуется устойчивое N-метиленпроизводное, усиливаются кислотные свойства аминокислоты. Образовавшееся N-метиленпроизводное (N-метиленденовое (азометиновое)) будет в реакции нейтрализации выступать какдвухосновная кислота. Индикатор – фенолфталеин или потенциометрически.

 

Кстех = 1/2; fэкв = 1/2; М.э. = М.м/2

 

Так определяют аминалон, метионин, цистеин, ФС аминокапроновую к-ту.

Аминалон Кстех = 1/1; fэкв = 1; М.э. = М.м

 

4. Ацидиметрический метод неводного титрования (титрование хлорной кислотой в среде безводной уксусной кислоты), для аминокислот с открытой аминогруппой (аминалон ФС, кислота глутаминовая, метионин, цистеин, пеницилламин). В среде безводной уксусной кислоты подавляются кислотные свойства групп кислотного характера и усиливаются основные свойства групп основного характера.

 

Механизм метода рассмотрим на примере аминалона. При растворении в протогенном растворителе - безводной уксусной кислотe цвиттер-ионная форма аминокислоты переходит в катионную. Индикатор - кристаллический фиолетовый (от фиолетового до зеленого окрашивания).

f экв.(глутаминовой к-ты) = 1

 

5. Спектрофотометрический метод в видимой области спектра. Для получения окрашенных продуктов используют реакцию с нингидрином (гранулы кислоты глутаминовой для детей). У окрашенных продуктов определяют оптическую плотность. Расчет проводят по стандартному раствору.

 

6. Поляриметрический метод расчет по значению угла вращения и удельному вращению.

 

Хранение: ХУТ, защищающая от действия света.

Применение

Для лечения заболеваний ЦНС: эпилепсии, психозов, депрессивных состояний. Стимулирует окислительно- восстановительные процессы в организме, является нейромедиатором. Проявляет дезинтоксикационное действие.





Рекомендуемые страницы:

Воспользуйтесь поиском по сайту:
©2015- 2020 megalektsii.ru Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав.