 |
Понятие о резус-факторе. Способы определения резус-фактора. Методика проведения реакции. . Оценка совместимости крови донора и реципиента
|
|
|
|
ПОНЯТИЕ О РЕЗУС-ФАКТОРЕ
В 1940 г. в эритроцитах человека был обнаружен еще один антиген (агглютиноген), который назвали резус-фактором. Установлено, что резус-фактор присутствует у 85% людей, т. е. они являются резус-положительными (КЬ+), остальные 15% являются резус-отрицательными (Кп-). В отличие от групповых свойств агглютиногенов А и В, по отношению к резус-фактору (резус-антигену) в норме в крови не имеется антирезус-агглютинов (готовых антител). Такие антитела появляются в сыворотке крови лишь в результате иммунизации человека с резус-отрицательной кровью резус-положительными эритроцитами. Такая иммунизация наступает в результате повторных переливаний резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту или при беременности женщины с резус-отрицательной кровью резус-положительным плодом. Люди, иммунизированные подобным образом, становятся сенсибилизированными к повторным переливаниям резус-положительной крови. При этом происходят тяжелые посттрансфузионные реакции вплоть до летального исхода. Поэтому нужно твердо помнить, что реципиенту с резус-отрицательной кровью можно переливать только резус-отрицательную кровь.
СПОСОБЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ФАКТОРА
Методы определения резус-фактора делятся на применяемые в клинике, не требующие специального лабораторного оснащения, и лабораторные способы.
Существует два способа определения резус-фактора в клинике (так называемые экспресс-методы):
- экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом в пробирке без подогрева;
экспресс-метод на плоскости без подогрева.
Для первого способа может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца или из вены непосредственно перед исследованием, консервированная кровь без предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после формирования сгустка и отстаивания сыворотки.
|
|
|
Методика проведения реакции.
Для исследования понадобятся центрифужные пробирки не менее 10 мл в объеме. На дно пробирки наносят одну каплю стандартного универсального реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ (IV), содержащую 33% раствор полиглюкина. Затем туда добавляют каплю исследуемой крови или эритроцитов. После этого содержимое размазывают по внутренней поверхности пробирки круговыми вращениями пробирки, добиваясь, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию. Агглютинация наступает обычно в течение первой минуты, но наблюдать следует не менее 3 минут, чтобы успел образоваться устойчивый комплекс «антиген-антитело» и агглютинация проявилась отчетливо.
После этого в пробирку добавляют 2-3 мл физиологического раствора и перемешивают путем однократного или двукратного перевертывания пробирки, но ни в коем случае не взбалтывая ее.
Крупные хлопья на фоне просветленной жидкости, свидетельствующие об агглютинации, указывают на резус-положительную принадлежность крови. Гомогенно окрашенная розовая жидкость в пробирке указывает на отсутствие агглютинации и на резус-отрицательную принадлежность крови.
Методика определения резус-фактора на плоскости без подогрева
На белой пластинке со смачиваемой поверхностью пишут фамилию и инициалы лица, кровь которого исследуется. На левом краю пластинки делается надпись «сыворотка-антирезус», на правом -«контрольная сыворотка». Контрольной сывороткой служит сыворотка группы АВ (IV), разведенная альбумином, не содержащая антител. В соответствии с надписями на пластинке помещают по 1 - 2 капли (0, 05 - 0, 1 мл) реактива и резус-контрольной сыворотки. К обеим каплям добавляют исследуемые эритроциты. Кровь размешивают с реактивом сухой стеклянной палочкой, размазывая ее на пластинке до образования капли диаметром 1, 5 см. Пластинку слегка покачивают. Через 3-4 минуты для снятия возможной неспецифической агглютинации в каждую каплю добавляют 5-6 капель физиологического раствора. После этого пластинку покачивают в течение 5 минут.
|
|
|
Наличие хорошо выраженной агглютинации в капле свидетельствует о резус-положительной принадлежности крови, отсутствие агглютинации (гомогенная окраска) - о резус-отрицательной.
ОЦЕНКА СОВМЕСТИМОСТИ КРОВИ ДОНОРА И РЕЦИПИЕНТА
Для выявления совместимости крови по системе АВО Оттенберг ввел правило, согласно которому агглютинируются эритроциты переливаемой крови, а не крови больного. В соответствии с этим правилом возможно переливание разногруппной крови, а представители группы АВ (IV) являются универсальными реципиентами,
Но современными исследованиями установлено, что правило Оттенберга применимо лишь при переливании до 0, 5 литра донорской крови.
Что касается резус-совместимости, то, как уже было сказано, резус-положительным пациентам принципиально можно переливать резус-отрицательную кровь. Но в связи с современными достижениями иммунологии и клинической практики в современной хирургии действует правило, согласно которому можно переливать только одногруппную и однорезусную кровь, за исключением экстренных случаев. Переливание иногруппной крови у детей запрещено вообще.
Пробы на индивидуальную совместимость
Пробы на индивидуальную совместимость проводятся в процессе подготовки к гемотрансфузии. Ставят две реакции: пробу на индивидуальную совместимость по системе АВО и по резус-фактору. Предварительно для постановки реакций у реципиента из вены берут кровь, которую разделяют сгусток и сыворотку (отстаиванием или центрифугированием).
а) Проба на индивидуальную совместимость по системе АВО
На белую поверхность (тарелку, пластинку) наносят крупную каплю {0, 1 мл) сыворотки крови реципиента и маленькую капельку (0, 01 мл) крови донора из флакона и смешивают их между собой, периодически покачивая тарелку (пластинку). Реакция проводится при температуре 15 - 25°С, результаты оценивают через 5 минут: отсутствие агглютинации эритроцитов донора свидетельствует о совместимости крови донора и реципиента по системе АВО. Появление агглютинации указывает на их несовместимость — такую кровь данному больному переливать нельзя.
|
|
|
б) Проба на индивидуальную совместимость по резус-фактору
После того как установлена совместимость крови донора и реципиента по системе АВО, необходимо установить совместимость в отношении резус-фактора. Проба на совместимость по резус-фактору может быть проведена в одном из двух вариантов:
- проба с использованием 33% полиглюкина;
- проба с использованием 10% желатина.
В клинической практике наибольшее распространение получила проба с полиглюкином. Проба с использованием 33% полиглюкина Реакция проводится в центрифужной пробирке без подогрева в течение 5 минут. На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента, 1 каплю донорской крови и 1 каплю 33% раствора полиглюкина. После этого содержимое перемешивают, наклоняя пробирку и вращая ее вокруг оси, распределяя содержимое по стенкам ровным слоем.
Пробирку вращают в течение 5 минут, после чего добавляют 3-4 мл физиологического раствора и аккуратно перемешивают, 2-3 раза наклоняя пробирку до горизонтальной плоскости (не взбалтывая! ). После этого оценивают результат: наличие агглютинации эритроцитов свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента по резус-фактору, такую кровь переливать нельзя. Равномерное окрашивание содержимого в пробирке, отсутствие реакции агглютинации указывает на совместимость крови донора и реципиента по резус-фактору.
Проба с использованием 10% желатина
На дно пробирки помещают 1 каплю эритроцитов донора, предварительно отмытых десятикратным объемом физиологического раствора, затем добавляют 2 капли подогретого до разжижения 10% раствора желатина и 2 капли сыворотки реципиента.
Содержимое пробирки перемешивают и помещают в водяную баню при температуре 46 - 48° С на 10 минут. После этого в пробирку добавляют б - 8 мл физиологического раствора, перемешивают содержимое, переворачивая пробирку 1-2 раза, и оценивают результат: наличие агглютинации эритроцитов свидетельствует о несовместимости крови донора и реципиента, ее переливание недопустимо.
Если содержимое пробирки остается равномерно окрашенным и в ней не наблюдается реакция агглютинации, кровь донора совместима с кровью реципиента по резус-фактору.
|
|
|
