 |
Забор материала для лабораторных исследований (исследование крови, мочи, мокроты, кала).
|
|
|
|
К числу объективных методов исследования относятся лабораторные методы исследования, исследования функционального состояния методом проб, рентгеноэлектрофизиологические, ультразвуковое обследование и другие.
К дополнительным методам относятся методы лабораторной диагностики, инструментальные, рентгенологические и др. методы. Они позволяют определить сущность патологического процесса. Так, если при проведении эндоскопии желудка выявляется опухолевое поражение, производят биопсию и цитологическое исследование полученного материала, определяя стадию заболевания. Результаты этих исследований позволяют выбрать тактику дальнейших действий врача: оперативное вмешательство, химиотерапия, лучевая терапия. При этом учитывается общее состояние больного, а также изменения со стороны других органов и систем, данные лабораторного исследования.
В выполнении процедур по забору биологического материала большая, если не ведущая роль принадлежит медсестре. Именно медсестра собирает мокроту, кровь, кал, мочу и т.д. и именно от нее зависит правильность сбора и соответственно результат анализа.
Лабораторные методы исследования находят все большее значение в клинической практике. За последнее десятилетие в лабораторную практику введено около 190 новых методов, позволяющих проводить лабораторные исследования в следующих направлениях:
- общеклинические исследования (мочи, кала, желудочного и дуоденального содержимого, ликвора, экссудатов, транссудатов и других биологических жидкостей);
- гематологические исследования (крови, костного мозга и др.);
- цитологические исследования;
- биохимические исследования (во всех биологических жидкостях);
|
|
|
- микробиологические исследования, включающие бактериологические, вирусологические и паразитологические методы исследования;
- иммунологические методы (в том числе и серологическая диагностика);
- изучение системы гемостазы.
Эти методы все чаще проводятся с использованием в практической лабораторной деятельности современного оборудования, автоматических и полуавтоматических анализаторов, диагностических унифицированных тест-систем, компьютерной обработки полученных результатов, что позволяет уменьшить возможность диагностических ошибок.
Появляются и новые направления, активно входящие в практическую клиническую лабораторную диагностику, такие, как молекулярная биология, состоящая из молекулярно-генетических и других методов исследования, объединяющих гистологические и цитологические варианты молекулярно-биологических методов. Все эти методы осуществимы с применением дорогостоящего лабораторного оборудования и диагностических тест-систем. Несмотря на увеличение точности диагностики с их применением, большое и, как правило, решающее значение остается за техникой получения исследуемого материала.
Оттого, как правильно получен, доставлен материал для дальнейшего лабораторного исследования, во многом зависит качество и информативность диагностики. Необходимо учитывать при сборе патологического материала и возможность комплексного исследования, например, сочетанное применение методик общеклинического, цитологического, бактериологического, паразитологического и иммунологического методов исследования. Это позволяет подходить к исследуемому процессу с различных позиций и давать более точную информацию о сущности патологического явления.
Общая структура исследований крови: методы исследований – гематологические, биохимические, иммунологические, микробиологические (Бактериологические, вирусологические, паразитологические), системы гемостаза.
|
|
|
Объекты исследований: венозная кровь, цельная кровь, сыворотка, плазма, гепаринизированная, цитратная, оксалатная кровь, капиллярная кровь (цельная, гепаринизированная, цитратная и оксалатная).
Клиническое исследование крови.
К гематологическим методам исследования относятся: определение гемоглобина крови; определение свободного гемоглобина плазмы; определение фракций гемоглобина; подсчет эритроцитов в крови; определение гематокритной величины (показателя); определение осмотической резистентности эритроцитов; подсчет ретикулоцитов; подсчет тромбоцитов; определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ); подсчет лейкоцитов; подсчет лейкоцитарной формулы с описанием морфологии форменных элементов крови. Взятие крови (для клинического исследования крови) - палец пациента протирают ватой, смоченной в спирте, а затем тугим стерильным ватным тампоном. Делают прокол кожи пальца на глубину 4 мм, ближе к его боковой поверхности. Первую выступившую каплю крови удаляют стерильным сухим ватным тампоном, а затем берут кровь для исследования (она должна вытекать свободно, без надавливания). В последних каплях свободно вытекающей крови определяют тромбоциты.
Определение концентрации гемоглобина гемоглобинцианидным методом: к 5 мл трансформирующего раствора прибавляют 20 мкл крови (разведение в 251 раз), тщательно перемешивают и оставляют стоять 10 мин. Затем измеряют оптическую плотность опытной пробы, сравнивая с холостой пробой на медицинском калориметре при длине волны 500–560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см. Нормальная концентрация гемоглобина в крови у женщин 120–140 г/л, у мужчин 130–160 г/л. Содержание в крови гемоглобина ниже критического (20–30 г/л) может привести к летальному исходу. Определение количества эритроцитов -определение количества эритроцитов в 1 л крови: капиллярной пипеткой набирают 20 мкл крови, кончик пипетки осторожно вытирают, кровь выдувают в пробирку, содержащую 0,9 % NaCl (хлорид натрия). Пипетку тщательно промывают в верхнем слое жидкости, содержимое пробирки перемешивают. Подсчет ведется в камере Горяева, после заполнения которой оставляют на 1 мин в состоянии покоя для оседания форменных элементов. Подсчет ведут при малом увеличении микроскопа (объектив 8x, окуляр 10х или 15х) при опущенном конденсоре в 5 больших квадратах (расчерченных на 16 малых), расположенных по диагонали. Количество эритроцитов в 1 мкл крови определяют по формуле: 
, где Х — количество эритроцитов в 1 мкл; А — количество эритроцитов в 80 малых квадратах; 200 — степень разведения крови; 4000 — множитель, приводящий результат к объему 1 мкл крови, т. к. объем малого квадрата 1/4000 мкл. Практически количество эритроцитов, подсчитанное в 80 малых квадратах, умножают на 10 000. Пересчитывая эритроциты в единицы системы СИ-Т (Тэра) в 1 л, полученную цифру умножают еще на 1 000 000. В норме количество эритроцитов у женщин составляет 3,7–4,7х10¹² /л, у мужчин 4–5,1 х10¹² /л. Уменьшение числа эритроцитов характерно для анемии, степень ее различна в зависимости от вида.
|
|
|
Определение количества лейкоцитов в 1 л крови: капиллярной пипеткой набирают 20 мкл крови и вносят в пробирку с 0,5%-ной уксусной кислотой, пипетку промывают раствором, содержимое хорошо перемешивают. Подсчет ведут в камере Горяева, заполнив которую, оставляют на 1 мин в состоянии покоя для оседания лейкоцитов. Подсчет ведут при малом увеличении микроскопа (объектив 8x, окуляр 10x или 15x) при опущенном конденсоре в 100 больших квадратах, что соответствует 1600 малым. Количество лейкоцитов в 1 мкл крови считают по формуле: 
, где Х — количество лейкоцитов в 1 мкл; А — количество лейкоцитов, сосчитанных в 100 больших квадратах; 1600 — количество малых квадратов; 20 — разведение крови;4000 — множитель, приводящий результат к объему 1 мкл крови, исходя из объема малого квадрата (1/4000 мкл).
Практически количество лейкоцитов, подсчитанное в 1600 малых квадратах, умножают на 50, а для перевода в единицы СИ (Гига в 1 л) полученную цифру умножают на 1 000 000. В норме количество лейкоцитов колеблется: 4–8,8 Г/л.
Определение скорости оседания эритроцитов: с помощью капилляра Панченкова набирают из пальца кровь два раза до метки «К» и вносят каждый раз в пробирку с цитратом натрия, смешивают, набирают эту смесь до метки «О» и ставят в штатив Панченкова на 1 ч в строго вертикальном положении. Скорость оседания выражают в мм за 1 ч. В норме СОЭ у женщин составляет 2–15 мм/ч, для мужчин 1–10 мм/ч.
|
|
|
Определение цветового показателя осуществляется вычислением по формуле: ЦП = количество гемоглобина (г/л) х 3 делят на первые две цифры выявленного числа эритроцитов в 1 мкл крови.
Приготовление мазков крови. На предметное стекло наносят небольшую каплю крови и шлифованным предметным стеклом прикасаются к ней под углом 45°. После того как капля растекается, между стеклами делают мазок справа налево до тех пор, пока капля полностью не распределится. Окраску мазков крови осуществляют по Паппенгейму или Романовскому.Окраска по Паппенгейму: сухие нефиксированные мазки помещают в контейнер и опускают в кювету с раствором красителя-фиксатора Май–Грюнвальда на 5 мин, после чего контейнер с мазками ополаскивают в кювете с дистилированной водой и докрашивают красителем Романовского (1–2 капли на 1 мл воды) на 10–15 мин. Затем смывают водой и высушивают на воздухе.Окраска по Романовскому осуществляется так же, как и по Паппенгейму, но фиксируется не реактивом Май–Грюнвальда, а этиловым спиртом (20–30 мин).
Подсчет лейкограммы следует проводить в тонких участках мазка, по верхнему и нижнему краю, передвигая мазок по линии меандра, начиная с самого края. Результаты подсчета лейкоцитов являются относительными, так как они изменяются в зависимости от общего количества лейкоцитов. При оценке данных лейкограммы, помимо процентного содержания лейкоцитов, следует учитывать их абсолютные величины. Лейкоциты у взрослого в норме в % и в единицах СИ (Г/л) cоставляют: базофильные гранулоциты — 0–1 % — 0–0,065 Г/л; эозинофильные гранулоциты — 0,5–5 % — 0,2–0,3 Г/л; палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты — 1–6 % — 0,04–0,3 Г/л; сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты — 47–72 % — 2,0–5,5 Г/л; моноциты — 3–11 % — 0,09–0,6 Г/л; лимфоциты — 19–37 % — 1,2–3,0 Г/л.
Определение гематокритной величины. Гематокритная величина устанавливает соотношение между объемом форменных элементов крови и всем объемом крови. Определяется с помощью центрифугирования гепаринизированной или цитратной крови в специальных капиллярах. В качестве гематокритной трубочки могут использоваться пипетки Панченкова, стянутые резиновым кольцом. Центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин. В норме общий объем эритроцитов у мужчин равен 0,4–0,48 л/л, у женщин — 0,36–0,42 л/л.
|
|
|
