Характеристика возбудителя

Вирус впервые описан в 1962 г. в районе Гамборо штате Делавер, США. Вначале забо­левание характеризовалось как птичий нефроз. Год спустя аналогичное заболевание было зарегистрировано в Австралии как "уремия". В 1962 г. вирус был выделен на КЭ, а за­болевание назвали "инфекционной бурсальной болезнью". Позднее заболевание с почечным синдромом было отнесено к инфекционному бронхиту, а заболевание с поражением бурсы Фабрициуса - к инфекционной бурсальной болезни.

Морфология и химический состав. Вирионы имеют форму 20-гранника, капсид со­стоит из 32 капсомеров, вирион безоболочечный, 55 нм в диаметре. У вируса установлена 2-спиральная РНК. Обнаружено 2 типа частиц вируса: большие - 55-60 нм и маленькие -18-22 нм при наличии одного поверхностного АГ. Вирус имеет 2 сегмента геномной РНК -А и В. Сегмент А кодирует полипротеин, который превращается в вирусные белки VP2, VP3, VP4 и VP5. РНК вируса в градиенте сахарозы седиментирует одним пиком с коэффициентом 14S, что соответствует мол.м. 2,2-10⁶ Д. Плавучая плотность ее в CsCl 1,62 г/см³, в градиенте сахарозы - 1,178 г/см³. Вирусная РНК на 95% устойчива к действию РНК-азы А. Белок VP3 обладает высокой иммуногенностью, он имеет эпитопы, индуцирующие син­тез ВНА. Из вируса выделен один из главных структурных белков VP2b и VP2a. Конформационный эпитоп белка VP 2а/2b - один из главных субъединиц вируса ИБ типа I, ответст­венных за иммуногенность. Результаты свидетельствуют о том, что выбор вакцинного штамма вируса ИБ должен проводиться с учетом АГ структуры эпизоотического штамма.

Устойчивость. Вирус резистентен к эфиру, хлороформу и изменению рН (2-11). Инактивируется при рН 12. Сохраняет активность при 56°С 5ч, при 60°С 30 мин, а при 30°С в сухом помещении 150-180 дн; в присутствии 0,5%-ного фенола или 0,125%-ного мертис-лята 1 ч.При воздействии 0,5%-ного формалина инактивируется за 6 ч, препаратами йода -за 2 мин при 23°С, 0,5%-ным хлорамином - за 10 мин. Устойчив к фотодинамии и УФ-облучению, чувствителен к актиномицину Д.

Антигенная структура, вариабельность и родство. В структуре вируса обнаружено 5 белков. В структуре вириона выявлены белки VP1, VP2b (происходящий из VP2), VP2a предшественник протеина VP2 и VP3. Протеин VP2 ответственен за индукцию ВНА и типоспецифичность, а группоспецифичность обеспечивается белком VP3. Серотип I, выде­ленный от цыплят и патогенный для них, насчитывает 6 подтипов. Серотип II, изолирован­ный от индеек, не патогенен для цыплят и индюшат, однако в отдельных случаях вызывает поражение респираторного тракта и суставов у индюшек до 16-нед возраста.

В 1986 г. идентифицировано уже 3 серотипа вируса. Вирус 1-го серотипа содержит белки VP1, VP2, VP3 и VP4, а также белок VPx, который является предшественником VP2. У вируса 2-го серотипа обнаружены белки, соответствующие VP1, VP2, VP3 и VP4. В Англии в подав­ляющем большинстве стад кур AT обнаружены одновременно к обоим серотипам. Между вирусами 2-х серотипов существует лишь небольшое АГ-родство.

У индеек установлено 2 серотипа вируса ИБ. Множество АГ вариантов вируса ИБ делится серологическими методами на несколько групп: гомология меньше 10% - различия в серотипе, гомология 10-32% - большой подтип, гомология 33-70% - малый подтип, гомология 71-100% - слабое различие или его отсутст­вие. Все штаммы данного вируса иммуносупрессивны. Смертность и иммуносупрессия свя­заны со стандартными и высоковирулентными штаммами 1-го серотипа. До 1980 г. преоб­ладала циркуляция стандартного вируса, позже - его варианты.

Вакцинация цыплят серотипом I не снимает возможную иммунодепрессию и экономические потери при инфицировании серологически отличными вариантами.

В России изучена АГ вариабельность 6 вакцинных штаммов вируса ИБ с целью их эффективного применени. Вакцин­ные штаммы подразделяются на 2 группы, которые существенно отличались друг от друга (8% аминокислотных замен). Выбор вакцинного штамма вируса ИБ должен проводиться с учетом АГ структуры эпизоотического штамма. Целесообразно использовать вакцинный штамм, обладающий наибольшей степенью гомо­логии в области АГ-детерминанты с эпизоотическим штаммом вируса ИБ. АГ вариа­бельность штаммов, изолированных в России, изучена методом прямого секвенирования.

Локализация вируса. На 3-й день после экспериментального заражения 4-4,5-нед цып­лят вирус в высоких концентрациях накапливается в фабрициевой сумке и селезенке, и в более низких концентрациях - в мозге и крови. Из бурсальной ткани его выделяли до 14-го дня после заражения, в ИФ - до 5-6-го, в ИД - до 3-4-го дня. У 1-дн цыплят через 3 дня по­сле введения вируса отмечена высокая концентрация его в фабрициевой сумке, печени и почках. Вирус хорошо реплицируется в макрофагах и несколько хуже - в ретикулярных клетках, гетерофилах, эпителиальных клетках. Недавно было показано, что вирус размно­жается в лимфоцитах. Лимфолитические явления наблюдались через 8 ч после заражения. При экспериментальном заражении вирус удавалось выделять в течение 10 дн, однако патологические изменения в фабрициевой сумке сохранялись до 10 нед после заражения. Это указывает на малую вероятность носительства вируса, кратковременность его нахо­ждения в крови и возможность длительного обнаружения поражений фабрициевой сумки

Антигенная активность. Через 3 нед после заражения 3-6-нед цыплят вирусом в сы­воротках крови обнаруживают ВНА (достигают титра 1:718) и ПА. К 14-му дню титр ПА достигал 1:128, и цыплята приобретали устойчивость к заражению патогенным вирусом. AT у кур-несушек передаются потомству трансовариально. ПА в сыворотке крови появляются у птиц на 7-й, в фабрициевой сумке - на 12-й, в селезенке - на 15-й день после заражения. ВНА в индюшиных хозяйствах Германии устанавливали сразу после вылупления птенцов. Количество положительных сывороток к серотипу I варьировало от 65 до 80%, в других же хозяйствах количество положительных сывороток к серотипу II достигало 75-100%.

Экспериментальная инфекция. Воспроизводится на 20-30-дн цыплятах при инокуля­ции им вируссодержащего материала на слизистую оболочку глаз, в фабрициеву сумку или per os. Первые признаки болезни проявляются тремором головы и тела, а через 48 ч - диа­реей. На 3-й день фекалии становятся беловатыми и содержат слизь, но к 7-му дню болезни приобретают нормальный вид. На 3-4-й день после заражения у цыплят отмечали увеличе­ние фабрициевой сумки в 1,5-2 раза и отек. Бурса мягкая, бугристая, содержала вязкий слизистый материал, внутренние складки воспалены и желтого цвета. На 22-23 сут после зара­жения фабрициева сумка обычно уменьшается, консистенция ее становится плотной и на разрезе гладкой, слизь отсутствует. В эпителиальных и ретикулярных клетках пораженных фолликулов обычно обнаруживались ацидофильные включения, окруженные светлым ареа­лом. Некротические участки фолликулов обильно заселены макрофагами. У части отмеча­ют псевдокисты. Через 3-5 да после заражения патологические изменения фабрициевой сумки были настолько выраженными, что болезнь диагностировалась без затруднения.

На ЗЗ, 51 и 71 дни после заражения можно наблюдать атрофию бурсы. У 1-3 сут белых мышей при интраперитонеальном и интрацеребральном их заражениях (шт. Becht) отмеча­ли зуд, атаксию, дрожь, кому и негнойные лимфоцитарные воспаления мозговой ткани, со­провождавшиеся некрозом, демиелинизацией и скоплением лейкоцитов вокруг кровенос­ных сосудов. Крысы и хомяки также оказались чувствительными к интрацеребральному за­ражению. Индейки клинически не реагировали, но образовывали ПА и ВНА. Голуби, утки, гуси и перепела к экспериментальному заражению оказались резистентны. После интрабурсального заражения здоровых цыплят вирусный АГ в тканях фабрициевой сумки по­являлся в 100% случаев через 12-14 ч и обнаруживался с помощью МФА и РДП. Утки чувствительны к вирусу ИБ серотипов I и II, но не проявляют клинических симптомов бо­лезни, между тем серотип II широко распространен в природе. Патогенность вируса для утят сравнительно низкая, и переболевание сопровождается анорексией с небольшим подъ­емом температуры в течение 4-5 дн после заражения.

Культивирование. Вирус можно культивировать в КЭ, свободных от материнских AT к ряду вирусных болезней, в том числе и к ИБ. Помимо эмбрионов вирус удается культиви­ровать и на SPF-цыплятах. У инфицированных эмбрионов вирус накапливается в желточ­ном мешке и в меньшей степени - в аллантоисной жидкости. Гибель КЭ наступает на 3-8-й день после заражения. У погибших отмечали отечность брюшной полости, кровоизлияния и некрозы на теле, некроз и кровоизлияния в печени, почках, гиперемию легких. На ХАО ви­димых поражений не развивается, лишь иногда обнаруживают небольшие кровоизлияния. Отмечены "бледное сердце", гиперемия и некроз почек, гиперемия легких. Японские штам­мы вируса размножаются в утиных эмбрионах (лучше при заражении на ХАО, чем в жел­точный мешок) и в культуре утиных фибробластов, но не в культуре клеток почки. Вирус хорошо репродуцируется в культуре почечных клеток КЭ, вызывая на 3-5-й день заражения ЦПД. Данная культура пригодна для титрования вируса, последовательные пассажи в ней не ведут к аттенуации вируса в отношении цыплят. В культуре фибробластов КЭ вирус об­разует бляшки. В-клетки высокочувствительны к вирусу, а Т-клетки - нечувствитель­ны.