 |
Идентификация стрептококков
|
|
|
|
Целью первичной идентификации является установление принадлежности выделенной культуры к семейству Streptococcaceae и роду Streptococcus. Для установления принадлежности культур к семейству Streptococcaceae используют тест на каталазу.
В отличие от родственного семейства микрококков представители семейства стрептококков не имеют фермента каталазы, и не способны расщеплять перекись водорода с образованием воды и газообразного кислорода.
Установление принадлежности культур к роду Streptococcus
На этом этапе исследования применяют методы, позволяющие идентифицировать стрептококки. К их числу относятся бактериоскопический, культуральный и биохимический методы.
Бактериоскопический метод
В мазках, окрашенных по Граму, стрептококки располагаются цепочками, или по четыре. Размеры микробных клеток стрептококков 0,6-1, мкм. Грамположительные кокки.
Культуральный метод
По виду гемолиза на кровяном агаре стрептококки делятся на 3 группы: гемолитические стрептококки, обусловливающие лизис эритроцитов с образованием вокруг колоний прозрачной зоны. При этом колонии могут быть мукоидные, шероховатые, гладкие. Зеленящие стрептококки образующие на кровяном агаре альфа-реакцию в виде полупрозрачной, зеленоватого оттенка зоны, обусловленной превращением гемоглобина в мет-гемоглобин. Негемолитические стрептококки, не реагирующие с эритроцитами и в процессе своего роста не вызывающие изменений кровяного агара.
Видовая идентификация стрептококков
Культуры гемолитических и зеленящих стрептококков, клетки которых при микроскопическом исследовании представляют собой грамположительные полиморфные кокки, располагающиеся парами, короткими цепочками или небольшими скоплениями необходимо дифференцировать с энтерококками.
|
|
|
Для этого суточную бульонную культуру высевают на желчно-солевой агар и в молоко с 0,1% метиленового синего. На ЖЩА растут только энтерококки в виде круглых, блестящих колоний с ровным краем, синеватого цвета. В пробирках с молоком энтерококк редуцирует метиленовый синий, вследствие чего среда обесцвечивается и из голубой становится кремового цвета через 16-20 часов инкубации в термостате.
Способность микробных клеток к росту на ЖЩА. и редуцированию 0,1% метиленового синего в молоке указывает на принадлежность исследуемой культуры к группе энтерококков.
Дифференциация энтерококков внутри группы
Внутри группы энтерококки делятся по ферментативным, редуцирующим и гемолитическим свойствам на ряд видов и подвидов. Дифференциация культур энтерококка внутри групп ведется по следующей схеме:
| Виды и подвиды | Резистен-тность к теллуриту каллия | Энтерококковая дифференциально-диагностическая среда | Подви-жность в 0,2% агаре | ||
| редукция ТТХ | гемолиз | протеолиз | |||
| 1. S. faecalis 2. S. faecalis subsp. zymogenes 3. S. faecalis liquefaciens 4. S. faecium 5. Подвижные энтерококки | + + + – + | + + + – + | – + – ± ± | – ± + – – | – – – – + |
Вопросы для обсуждения
1. Морфология, тинкториальные и культуральные cвойства стрептококков.
2. Токсины и ферменты стрептококков.
3. Классификация стрептококков по гемолитическому признаку и антигенной структуре.
4. Заболевания, вызываемые патогенными стрептококками.
5. Лабораторная диагностика.
6. Препараты, используемые для лечения и профилактики стрептококковых инфекций.
Самостоятельная работа студентов
1. Познакомится со схемой исследования при кокковых заболеваниях.
2. Микробиологический диагноз стрептококковых заболеваний:
|
|
|
а. изучить демонстрационный препарат из чистой культуры стрептококка; зарисовать;
б. изучить рост стрептококка на кровяном МПА и на МПБ;
в. сделать посев гноя на чашку с кровяным МПА;
г. изучить демонстрационный посев гноя на кровяном агаре;
д. приготовить мазок из гноя, окрасить его по Граму, зарисовать;
е. определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.
Схема лабораторного исследования при ангине и скарлатине
Материал для исследования: мазок из зева.
| День исследования | Ход исследования | Результат |
| 1 день 2 день | 1. Бактериоскопия мазка из зева, окраска по Граму 2. Посев мазка из зева на кровяной агар 1. Микроскопия мазка из колонии | В поле зрения грамположительные цепочки стрептококков Нa агаре мелкие точечные колонии в виде капелек росы с зоной гемолиза Цепочки стрептококка |
Заключение: В мазке обнаружен Streptococcus pyogenes.
Пневмококки
| Раздел | Вопросы для изучения |
| Биология возбудителя | I. Таксономия Пневмококки относятся к семейству Streptococcaceae, роду Streptococcus |
| 2. Основные биологические свойства: Морфологические – кокки, напоминающие пламя свечи: один конец клетки заострен, другой уплощен, располагаются парами, иногда в виде коротких цепочек. Спор не образуют. В организме человека и животных, а также на средах, содержащих кровь или сыворотку образуют капсулу. Тинкториальные – грамположительные кокки, но в молодых и старых культурах нередко грамотрицательны. Культуральные: факультативные анаэробы, температурный оптимум – 37°С., оптимальная рН = 7,2-7,6. Для культивирования используют кровяной агар, где колонии мелкие, круглые, окруженные зоной гемолиза (альфа-гемолиз), рост на сахарном бульоне не сопровождается помутнением и выпадением небольшого осадка. Биохимические свойства. Ферментация углеводов: глюкозы, сахарозы с образованием кислоты, без газа. Факторы патогенности: 1. Амилаза – активизирующуюся под влияющем желчных кислот, разрывающая связь между аланином и муравьиновой кислотой пептидогликана. 2. Капсула – главный фактор патогенности бескапсульные пневмококки утрачивают вирулентность. Антигенные свойства: кроме соматического 0-антигена, пневмококки имеют капсульный полисахаридный антиген, по которого разделяют на 83 сероварианта, 56 из них разбиты на 19 групп, 27 представлены самостоятельно. | |
| Эпидемио-логия | Источником пневмококковой инфекции является больной человек или реконвалесцент. Заражение происходит воздушно-капельным или воздушно-пылевым путем. |
| Патогенез | Пневмококки являются основным возбудителем острых и хронических воспалительных заболеваний легких. Кроме того, они вызывают ползучую язву роговицы, отиты, эндокардит, перитониты, менингиты, септицемии и другие гнойно-воспалительные процессы. |
| Постинфек-ционный иммунитет | Типоспецифический, обусловлен появлением антител, против типового капсульного полисахарида. |
Для специфической профилактики пневмококковых пневмоний у пожилых и ослабленных людей, а также лиц с иммунодепрессией можно использовать химическую пневмококковую вакцину, содержащую типоспецифические полисахариды нескольких типов пневмококков. В последнее время для специфической профилактики различных, в том числе и стрептококковой этиологии, поражений верхних дыхательных путей очень часто рекомендуется вакцина IR S19.
|
|
|
|
|
|
