 |
ГЛАВА 1. Литературный обзор
|
|
|
|
Выпускная квалификационная работа
на тему: оценка антибиотикочувствительности микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта
Выполнила:
студентка 522 группы
Нестерова М.И.
Научный руководитель: к.м.н. Михайлова Е.С.
Научный руководитель:
к.б.н. Королева И.В.
Санкт-Петербург
2016 год
ОГЛАВЛЕНИЕ
Перечень условных обозначений …………………………………………...4
Введение
Актуальность………………………………………………………………..5
Цель и задачи исследования………………………………………………..6
Научная новизна работы…………………………………………………...7
Практическая значимость работы…………………………………………7
Глава 1. Литературный обзор
1.1. Этиология и патогенез воспалительных заболеваний пародонта…...8
1.2. Микробиота полости рта и воспалительные заболевания
пародонта……………………………………………………………….18
1.2.1. Нормальная микробиота полости рта……………………….…18
1.2.2. Микробиота пародонтального кармана при хроническом генерализованном пародонтите…………………………………..19
1.2.3. Вирулентные свойства пародонтопатогенов…..………………22
1.3. Антибиотики в комплексном лечении заболеваний пародонта……32
1.4. Механизмы устойчивости к антибиотикам…………………………35
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Клиническая характеристика пациентов………....…………………39
2.2. Оценка стоматологического статуса пациентов…………………....39
2.3. Микробиологические и генетические методы исследования
2.3.1. Забор материала………………………….………………………45
2.3.2. Культуральные среды и условия роста……...…………………45
2.3.3. Выделение чистой культуры……………………………………45
|
|
|
2.3.4. Выделение тотальной ДНК из исходного биологического
материала……………………………………………….………..46
2.3.5. Конструирование олигонуклеотидных праймеров…….…..….46
2.3.6. Полимеразная цепная реакция………………………………….47
2.3.7. Электрофорез и выделение ДНК из агарозного геля,
определение концентрации ДНК…………………………….…48
2.3.8. Определение антибиотикочувствительности…………….……49
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Результаты клинических исследований………………………..……51
3.2. Результаты рентгенологического исследования……………………54
3.3. Результаты микробиологических исследований
3.3.1. Выделение факультативных анаэробов……………..…………54
3.3.2. ПЦР-скрининг на пародонтопатогены…………………………57
3.3.3. Идентификация выделенных чистых культур…………………59
3.4. Антибиотикочувствительность идентифицированных чистых
культур………………………………………………………………….66
Глава 4. Заключение и выводы
4.1. Заключение……………………………………………………………69
4.2. Выводы……………………………………...…………………………71
4.3. Практические рекомендации……………...…………………………72
Список литературы ………………………………...………………………..73
Приложения …………………………………………………………………..77
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
ВЗП – воспалительные заболевания пародонта
ВОЗ – всемирная организация здравоохранения
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЛПС - липополисахарид
ПЦР – полимеразная цепная реакция
ХГП – хронический генерализованный пародонтит
CPITN – Community Periodontal Index of Treatment Needs
OHI–S – Oral Hygiene Indices–Simplified
РМА – папиллярно–маргинально–альвеолярный индекс
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность:
Воспалительные заболевания пародонта (ВЗП) относятся к наиболее распространенной стоматологической патологии.
В мире, согласно данным Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ, 1997), более 80% населения подвержено ВЗП, которые приводят к потере зубов, появлению в полости рта очагов хронической инфекции, снижению реактивности организма, микробной сенсибилизации, развитию аллергических состояний (Маланьин И.В., Емелина Г.В., Иванов П.В., 2010).
|
|
|
В связи с огромным количеством накопленной информации о роли разных видов микроорганизмов в развитии ВЗП, ВОЗ (1994 - 1995) рекомендовала среди нормальной микробиоты полости рта с анаэробным типом дыхания выделять так называемые «пародоптопатогенные» виды, отличающиеся от других видов микроорганизмов высокими адгезивными, инвазивными и токсическими свойствами по отношению к тканям пародонта (Царев В.Н. с соавт., 1996; Царев В.Н., 2004).
К «пародонтопатогенным» видам микроорганизмов относят: Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Prevotella intermedia, Treponema denticola, Fusobacterium nucleatum, Actinobacillus actinomycetemcomitans и др. (Елисеева А.Ф., 2014).
Следовательно, это определяет ряд задач, которые должны быть направлены на выявление и идентификацию пародонтопатогенов, и новые подходы к лечению ВЗП.
Несмотря на усовершенствование методов микробиологической диагностики - использование анаэробной техники культивирования, газовой хроматографии, иммунохимического анализа, проблема этиологической диагностики и лечения ВЗП остается одной из основных в стоматологии.
На сегодняшний день существует необходимость разрабатывать новые методы лечения с дифференцированным применением лекарственных средств, так как имеются трудности в подборе эффективного антибактериального препарата (Царев В.Н., Ушаков Р.В., 2006). Это связано с тем, что интенсивное и неконтролируемое применение химиопрепаратов привело к формированию и распространению множества штаммов микроорганизмов резистентных к антибактериальному лечению. Поэтому в настоящее время для осуществления и совершенствования комплексного персонализированного лечения ВЗП актуальным является определение чувствительности микробиоты пародонтальных карманов к антибиотикам.
Исследование микробиоты пародонтальных карманов позволяет диагностировать ВЗП, прогнозировать дальнейшее развитие заболевания, контролировать эффективность лечебных мероприятий и подбирать наиболее эффективную антибактериальную терапию.
|
|
|
Таким образом, оценка антибиотикочувствительности микробиоты пародонтальных карманов с помощью микробиологических методов исследования позволит подобрать наиболее эффективные антибактериальные препараты для лечения ВЗП и составить рекомендации по их использованию.
Цель исследования:
Определение антибиотикочувствительности микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом (ХГП) легкой степени тяжести.
Задачи исследования:
1. Изучить количественный и качественный состав микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с ХГП легкой степени тяжести;
2. Провести анализ антибиотикочувствительности микробиоты пародонтальных карманов у пациентов с ХГП легкой степени тяжести;
3. На основании клинико-микробиологических данных сформулировать рекомендации по применению антибактериальных препаратов у пациентов с ХГП легкой степени тяжести.
Научная новизна работы:
Проведена оценка антибиотикочувствительности выделенных чистых культур микробиоты пародонтальных карманов пациентов с ХГП легкой степени тяжести. С помощью масс-спектрометрии идентифицированы культуры - Streptococcus gordonii, Streptococcus anginosus, Streptococcus sanguinis, Streptococcus oralis, Neisseria perflava, Rothia mucilaginosa. Проведено секвенирование и идентифицированы культуры - Rothia mucilaginosa, Streptococcus mitis, Streptococcus oralis. Проведен ПЦР – скрининг на пародонтопатогены и определены Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Prevotella intermedia.
Практическая значимость работы:
Использование антибиотиков из группы бета-лактамов, макролидов и фторхинолонов, обладающих выраженной активностью в отношении наиболее часто встречающихся видов бактерий, вызывающих ВЗП, позволяет рекомендовать их в качестве эффективных средств комбинированного лечения ХГП легкой степени тяжести.
ГЛАВА 1. Литературный обзор
|
|
|
