 |
3.2.1 Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп в ходе проведения 9-ти месячного эксперимента
|
|
|
|
3. 2. 1 Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп в ходе проведения 9-ти месячного эксперимента
При оценке уровня кортизола сравнительный анализ проводился между разными группами крыс. В начале эксперимента концентрация гормона стресса была наиболее значимой и составляла 57, 21 нМ/л. Последующее определение кортизола произвели после 3, 6 и 9 месяцев эксперимента в различных группах крыс.
В среднем значения кортизола в группах крыс имеют одинаковые значения в ходе проведения 9 месячного эксперимента и составляет 36 ±3 нМ/л. Так, у крыс в группе контроля (КГ) уровень кортизола в ходе проведения эксперимента в среднем составлял 38, 52 нМ/л. В группе крыс, подвергающихся изнурительным физическим нагрузкам на протяжении 9 месяцев (группа «ФН») уровень данного гормона не сильно отличался от такового в контрольной группе крыс и составлял 37, 25 нМ/л, также как и в группах описанных выше в группе «ИС» и группе крыс, подвергаемых комбинированным стрессорным нагрузкам «КН», уровень кортизола уменьшился примерно в 1, 5 раза по сравнению с началом эксперимента составляя 36, 22 нМ/л и 35, 25 нМ/л соответственно (таблица 11, рисунок 20).
Таблица 11. Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп в ходе проведения эксперимента
| Гормон | Начало эксперимента | КГ | ФН | ИС | КН |
| Концентрация кортизола (нМ/л) | 57, 21 | 38, 52 | 37, 249 |
36, 22 | 35, 25 |
Рисунок 20– Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп в ходе проведения 9-ти месячного эксперимента относительно начальной точки
3. 2. 2 Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп относительно начала эксперимента
|
|
|
Установлено, что концентрация кортизола во всех исследуемых группах значимо снижается на 3-й месяц исследования в среднем на 22 нМ/л, значительно падает уровень кортизола в группе ИС на 26 нМ/л по отношению начальной точки, на 23 нМ/л в группе комбинированного воздействия, в группе принудительного плавания на 20 нМ/л (рисунок 21, таблица 12). К тому же, в группе контроля также наблюдалось снижение концентрации кортизола на 19 нМ/л. Во второй точке (через 3 месяца воздействия) отмечался пониженный уровень кортизола в группе ИС по сравнению с показателями в контрольной группе (38. 9±1. 55 против 30. 7±1. 89 нМ/л, P=0. 022). Далее, на 6 месяц эксперимента в группе контроля продолжает падать уровень кортизола на 23 нМ/л относительно начальной точки (57, 2±3, 34 против 34, 3±2, 75 нМ/л, P=0. 01). При сравнении между группами и точками эксперимента стоит также отметить, что группа крыс с ИС через 3 месяца воздействия имеет значимо низкий уровень кортизола относительно контрольной группы на 9 месяц эксперимента (30, 7±1, 89 против 42, 5±2, 23 нМ/л, P=0. 014).
Таблица 12. Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп относительно начала эксперимента
| Концентрация кортизола (нМ/л) | Нач. точка | КГ | ФН | ИС | КН |
| 3 мес | 57, 21 | 38, 94 | 37, 35 | 30, 71 | 33, 96 |
| 6 мес | 57, 21 | 34, 32 | 37, 55 | 38, 24 | 35, 99 |
| 9 мес | 57, 21 | 42, 5 | 36, 85 | 39, 56 | 36, 97 |
Рисунок 21– Изменение концентрации кортизола (нМ/л) в сыворотке крови у крыс разных групп в начале эксперимента и после воздействия стрессовых факторов в течении 3, 6 и 9-ти месяцев воздействий.
3. 3 Корреляционный анализ между уровнем кортизола и относительной экспрессией генов
По результатам исследований Tafet и Bernandini (Tafet, Bernardini, 2003) показано, очевидное влияние хронического стресса на уменьшение содержания биогенных аминов. Помимо этого, в подобных исследованиях других авторов было показано, что высокий уровень глюкокортикоидов-кортизола и кортикостерона, который возникает под действием хронического стресса вызывает резкое снижение активности серотонинергической системы, через внутриклеточные рецепторы глюкокортикоидов подавляется синтез 5-Нt1-рецепторов (Кочетков, 2004).
|
|
|
В нашем исследовании значимой корреляционной зависимости между уровнем кортизола и уровнем экспрессии гена рецептора серотонина 4 типа Htr4 практически во всех группах в ходе проведения 9ти месячного эксперимента не наблюдали. Однако было замечена прямая зависимость между уровнем глюкокортикоида в контрольной группе и относительным уровнем экспрессии гена переносчика серотонина Slc6a4 в течении 9-ти месяцев эксперимента(p=0. 0001), что может говорить о том, что острый стресс может влиять на экспрессию данного гена. В контрольной группе источником острого стресса явилась процедура взятия крови и смена обстановки при ее проведении, что могло повлиять на изменение относительного уровня экспрессии Slc6a4. Помимо этого, в нашем исследовании мы смогли увидеть прямую корреляционную зависимость между уровнем кортизола и экспрессией гена переносчика серотонина (Slc6a4) в группе с изнуряющими физическими нагрузками «ФН» в форме плавания после 6-ти месяцев эксперимента (р=0. 0034) (рисунок 22).
Рисунок 22– Корреляционная зависимость между уровнем кортизола и действием физических нагрузок на относительный уровень экспрессии генов серотониновой системы после 6 месяцев воздействий в группе «ФН»
В группе крыс с комплексом стрессовых факторов «ИС+ФН» и в группе с иммобилизационным стрессом «ИС» зависимость наблюдается только после 3 месяцев эксперимента (р=0, 0008, p=0. 0286) (рисунок 23, 24).
Рисунок 23– Корреляционная зависимость между уровнем кортизола и действием физических нагрузок на относительный уровень экспрессии генов серотониновой системы после 3 месяцев воздействий в группе «ИС+ФН»
Рисунок 24– Корреляционная зависимость между уровнем кортизола и действием физических нагрузок на относительный уровень экспрессии генов серотониновой системы после 3 месяцев воздействий в группе «ИС»
Данные результаты могут быть свидетельством возникновения при длительном воздействии на организм повреждающего фактора фазы устойчивости или адаптации к стрессовым факторам. Можно предположить, что в данную фазу произошло резкое снижение активности процессов, характеризующих стадию тревоги. Эта стадия отвечала высокому уровню соматической резистентности. Организм крыс стал более устойчивым как к действию раздражителя (стрессора) в нашем случае интенсивных физических нагрузок и иммобилизации после продолжительного действия стрессоров, так и другим патогенным факторам (перекрестная резистентность) в нашем эксперименте (предположительно) смена условий при взятии крови и сама процедура забора анализов.
|
|
|
Мы получили такие результаты, что имеет значение вид и длительность воздействий стрессовых факторов на изменение экспрессии генов серотониновой системы. Так, уровень экспрессии рецептора и переносчика серотонина возрастал после 6 и 9 месяцев воздействий в группе «ИС» и «ИС+ФН», однако после 3 месяцев воздействий активность экспрессии не сильно менялась, помимо этого экспрессия данных генов не варьировалась в группе «ФН». Относительно контрольной группы крыс уровни экспрессии данных генов уменьшалась во всех группах после 3 месяцев эксперимента. Различные значения были получены после 6 месяцев эксперимента, так по достижении данной точки значение экспрессии гена рецептора также была ниже, чем в контрольной группе, а экспрессия гена переносчика серотонина в группе, где имелся иммобилизационный стресс («ИС», «ФН+ИС») возросла, относительно КГ, после 9 месяцев уровень экспрессии рецепторного гена наращивалась, приближаясь к значениям экспрессии группы контроля, похожие результаты были получены в группах «ИС» и «ФН+ИС» с геном переносчика серотонина, а группа, подвергающаяся ФН смогла приблизится к значениям КГ уже по завершению 3 месяцев эксперимента, что может быть свидетельством того, что в нашем эксперименте крысы смогли адаптироваться к воздействию разных видов стрессоров.
|
|
|
В целом, мы смогли пронаблюдать связь экспрессии генов серотониновой системы с различными видами стрессоров по завершении 3, 6 и 9 месяцев эксперимента, наши результаты предполагают, что воспринимаемое воздействие стресса на экспрессию генов может варьироваться в зависимости от нейроэндокринной реакции и воздействия факторов окружающей среды и может быть более сильным у тех, кто помимо стрессовой нагрузки занимаются физическими упражнениями.
Наблюдаемые результаты подгруппы могут быть заметными. Например, у крыс, контрольной группы мы смогли пронаблюдать корреляционную зависимость между уровнем экспрессии переносчика серотонина и уровнем кортизола в течении всех 9 месяцев эксперимента, что было сопоставимо с испытыванием стресса при взятии крови, в группе «ФН» такую зависимость мы смогли наблюдать только после 3 и 6 месяцев эксперимента, а в группе «ИС» и «ФН+ИС» только после 3 месяцев, что было обосновано перекрестной резистентностью к данной процедуре, после длительного воздействия более сильных раздражителей и дальнейшей адаптацией к данной процедуре.
Таким образом можно предположить более сильное влияние острого стресса на изменение активности гена Slc6a4, что может послужить базой для дальнейших исследований.
|
|
|
