Метод окраски капсул по Дюгиду

Метод окраски капсул по Дюгиду

1. На чистое предметное стекло петлей наносят тушь и смешивают ее с культурой. Покровное стекло помеща­ют таким образом, чтобы была накрыта лишь часть смеси.

2. Сложенной в несколько раз фильтровальной бумагой сильно прижимают покровное стекло к предметному стеклу до появления тонкого коричневатого слоя жид­кости между ними. Препарат смотрят под большим уве­личением, применяя безиммерсионные и иммерсионные объективы.

Капсулы выглядят прозрачными зонами вокруг преломляющих свет микроорганизмов на коричневато-чер­ном фоне.

Метод окраски капсул по Гиссу

1. Взятую петлей бактериальную суспензию смеши­вают с каплей нормальной лошадиной сыворотки или снятого молока на предметном стекле.

2. Высушивают мазок на воздухе и мягко фиксиру­ют его нагреванием.

3. Покрывают мазок красящим реактивом кристал­лического фиолетового (кристалический фиолетовый 0, 1 г, дистиллированная вода 100 мл) и нагревают до появления пара.

4. Отмывают кристаллический фиолетовый 20%-ным (вес/объем) водным раствором сульфата меди (CuSO₄ ´ 5H₂O). Подсушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.

Капсулы выглядят бледно-голубыми, а сами микро­организмы — темно-фиолетовыми.

Метод окраски капсул по Антони

1. Высушенный на воздухе мазок окрашивают в те­чение 2 минут 1% (вес/объем) водным раствором кристаллического фиолетового.

2. Краситель отмывают 20% (вес/объем) водным раствором сульфата меди (CuSO₄ ´ 5H₂O), удаляют избы­ток последнего и подсушивают фильтровальной бумагой.

Капсулы выглядят светло-голубыми, а микроорганиз­мы — темно-фиолетовыми.

Способ Михина

Фиксированный мазок (преимущественно из крови или селезеночной пульпы) окрашивают леффлеровской метиленовой синькой в течение 2—3 минут при подогревании (до появления паров). Затем краску быстро смывают водой и мазок высушивают фильтровальной бумагой. Лучше окрашивать старым раствором краски.

 

Микроскопическая картина: капсулы — светло-розовые, бакте­рии —темно-синие.

Способ Гисса

Тонкий мазок, зафиксированный на пламени, окрашивают раствором основного фуксина (1 часть насыщенного спиртового раствора краски + 19 частей дистиллированной воды) с нагреванием до отхождения паров, затем оставляют в покое на 30 секунд. После этого краску смывают большим количеством 20% водного раствора медного купороса и обсушивают без промывания водой между листами фильтровальной бумаги.

Микроскопическая картина: капсулы — голубого цвета, тела микробов —темно-красного, эритроциты — розового, плазма лейкоцитов — голубого, ядра лейкоцитов — темно-красного.

Способ Ольта

Мазок окрашивают 2—3% водным раствором сафранина в течение 1—3 минут с последующим быстрым смыванием водой. Раствор сафранина готовят перед употреблением, растворяя краску в горячей воде с последующим фильтрованием. На мазок наносят каплю воды, накрывают по­кровным стеклом, а на него помещают каплю иммерсионной жидкости. Благо­даря прохождению световых лучей через слой воды усиливается разница в лучепреломлении капсулы и тела бактерии; под микроскопом отчетливо видны окрашенные капсулы.

Микроскопическая картина: капсулы — бледно-желтого, а бактерии —коричневого цвета.

Модификация способа Ольта.

После окраски сафранином (по оригиналь­ной прописи) мазок докрашивают 1% водным раствором метиленовой синьки в течение 2 минут. Быстро смывают водой, высушивают.

Микроскопическая картина: палочки — синие, капсулы — розовые.

Способ Ребигера

Этот простой и демонстративный способ окраски со­стоит в том, что препарат фиксируют не пламенем, а формалином, причем фиксация происходит одновременно с окраской. Для этой цели готовят сле­дующий раствор: 15—20 г генцианвиолета растворяют в 100 мл 40% формалина, дают раствору постоять несколько часов. Затем этот насыщенный при комнатной температуре раствор фильтруют, после чего он готов к употреблению. Окрашивают нефиксированный мазок указанным выше раствором в течение 15—20 секунд, быстро промывают водой и высушивают.

Микроскопическая картина: капсулы — красновато-фио­летовые, бактерии — темно-фиолетовые.

С успехом можно окрашивать капсулы краской Романовского-Гимза. На фиксированный мазок наносят раствор краски (2 капли краски на 1 мл дистиллированной воды) на 15—20 минут. Краску быстро смывают водой и мазок высушивают фильтровальной бумагой.

Микроскопическая картина: капсулы — бледно-розового цвета, бактерии — синие.

Способ Гусельниковой

Для выявления капсульных микробов в культурах предлагается следующий способ: каплю 3—4% водного раствора конгорот нанести на абсолютно обезжиренное предметное стекло, добавить к ней одну каплю исследуемой культуры, тщательно размешать и оставить на 5—7 минут; затем каплю размазать по стеклу, как при изготовлении мазка крови, высу­шить на воздухе и микроскопировать с иммерсионной системой.

Микроскопическая картина: фон — красно-розовый, капсулы —бесцветные, микроорганизмы — розовые.

⇐ Предыдущая9101112131415161718Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: