 |
Микробиологическая диагностика
|
|
|
|
Материал для исследования: гной, слизь из зева и носа, моча и др. При подозрении на сепсис – кровь.
1. + ориентировочный. Из материала от больного делают мазки и окрашивают их по Граму.
2. + основа диагностики. Материал засевают на кровяной агар и выросшие колонии характеризуют по характеру гемолиза. Идентифицируют стрептококки по антигенным свойствам в РП со специфическими сыворотками. Для дифференциации стрептококков группы А от других бета - гемолитических стрептококков применяют тест чувствительности к бацитрацину, к которому изоляты стрептококков группы А чувствительны. ПЦР.
3. +Вирулентность микроорганизмов определяют внутрибрюшинным введением культуры стрептококков кроликам.
4. + при хронических формах, для подтверждения диагноза ревматизма. АТ к О-стрептолизину в РСК или РП, а также С-реактивного белка.
5. – тип иммунного ответа ВТ.
Лечение и профилактика
n Лечение антибиотиками (b-лактамы, аминогликозиды, макролиды). Резистентность развивается медленно.
n Стрептококковый бактериофаг
n При скарлатине ослабленным детям вводят иммуноглобулин.
n Профилактика:
· на источник инфекции – ранняя диагностика, госпитализация, полноценное лечение;
· на пути распространения – сан-просвет работа;
· на восприимчивый организм специфических мер профилактики не разработано, организация мер повышающих резистентность организма – здоровый образ жизни.
n Family. Vibrionaceae
n Genus. Vibrio
n Species. V. cholerae
Морфология
n Изогнутые или прямые палочки, размером — 1,5—3,0 мкм в длину и 0,2-0,5 мкм в ширину;
n спор и капсул не образуют;
n подвижны, имеют один полярно расположенный жгутик;
n образуют фильтрующиеся и L-формы;
n грамотрицательны, окрашиваются карболовым фуксином.
|
|
|
Культуральные свойства
n Аэроб.
n Щелочные среды:
• среда Монсура;
• СЭДХ – среда элективно-дифференциальная для выделения холерных вибрионов;
• TCBS - тиосульфит-цитрат-бромтимол-сахарозный агар);
n прозрачные голубоватые S-колонии.
n 1% пептонная вода – через 6 ч нежная пленка.
Ферментативные свойства
n Сахароза, манноза, арабиноза – 8 групп Хейберга.
n Холерные вибрионы – Хейберг-1: сахароза – К, манноза – К, арабиноза – «–»;
n расщепляют крахмал и декстрин, разжижают желатин, казеин;
n продуцируют индол, восстанавливают нитраты в нитриты, сероводород не образуют.
Антигенная структура
n Термостабильный О-АГ: 206 О-подгрупп.
n biovar cholerae и biovar eltor – О-1 подгруппа. Имеют общий А и 2 типоспецифических – В и С антигена.
n Серовары О-1: Огава (А, В), Инаба (А, С), Гикошима (A,B,C).
n Н-АГ термолабильны; общие для всего рода Vibrio.
n С 1993 г. – 0139 серогруппа.
n Варианты возбудителя холеры:
• О1 серогруппа V. cholerae biovar cholerae;
• О1 серогруппа V. cholerae biovar eltor;
• О139 серогруппа V. cholerae.
Патогенность
n Подвижность, хемотаксис – взаимодействие с эпителиоцитами;
n Фактор адгезии;
n фактор колонизации;
n ферменты: муциназа, гиалуронидаза, нейраминидаза, лецитиназа и др.;
n холероген – экзотоксин;
n экзотоксины типа LT, ST;
n эндотоксин (ЛПС).
Патогенез
n Источник – человек: больной, реконвалесцент, вибрионоситель. Больной выделяет возбудителя в огромном количестве – от 100 млн до 1 млрд на 2 мл испражнений, носитель до 100 тыс. Носительство у здоровых лиц до 42, у переболевших 7-10 дней.
n Механизм передачи–фекально-оральный.
n Пути передачи – водный, пищевой, контактно-бытовой.
n Входные ворота – слизистая тонкого кишечника.
n Инкубационный период – до 6 сут., чаще – 2-3 дня.
ВВ – за счет подвижности и хемотаксиса направляются к слизи – за счет ферментов патогенности проникают через нее – за счет факторов адгезии прикрепляются к эпителию и размножаются – колонизируют микроворсинки тонкого кишечника – выделяют экзотоксин –холероген.
|
|
|
n Колонизация, токсины → диарея → потеря жидкости → сгущение крови, обезвоживание, гипоксия, метаболический ацидоз → дегидратационный шок и острая почечная недостаточность.
n Наиболее поражаемые органы – слизистая и подслизистая тонкого кишечника.
n Выведение – испражнения больного.
Микробиологическая диагностика
n Материал: фекалии, рвотные массы, отрезки из верхней, средней и нижней частей тонкого кишечника (у умерших).
n Бактериоскопический метод. Мазки окрашивают по Граму; определяют подвижность.
n Бактериологический метод. 1% пептонная вода → Грам, РИФ, РА и реакция иммобилизации холерных вибрионов с О-холерной сывороткой → щелочной агар, TCBS → чистая культура → РА, ферментативные свойства по Хейбергу, фаголизабельность → заключение.
n Серологический метод. РА.
n Аллергологический, биологический методы «–».
Ускоренная диагностика холеры
Ускоренная идентификация вибрионов в пленке на поверхности 1% пептонной воды спустя 6 ч после посева (предварительный ответ). Проводят следующие тесты:
n 1. Микроскопия, окраска по Граму;
n 2.РА с сыворотками 01, 0139;
n 3.Специфическая иммобилизация с О-холерными диагностическими сыворотками;
n 4.РНГА с АТ-эритроцитарным диагностикумом;
n 5.Иммунофлюоресцентный метод;
n 6. ПЦР со специфическими праймерами;
n 7. Чувствительность к холерным фагам;
n 8. Принадлежность к группе Хейберга
Профилактика заболевания.
n ранняя диагностика холеры у больных стертыми формами, носителей и больных с типичной картиной заболевания.
n соблюдение санитарно-гигиенических требований на объектах общественного питания и водоснабжения, предупреждение возможного контактно-бытового пути заражения.
n Вакцина холерная корпускулярная инактивированная таблетированная сухая;
n вакцина холерная (Холероген-анатоксин+О-антиген) сухая или жидкая;
n вакцина холерная живая пероральная –используется ограниченно из-за опасности реверсии вирулентности, в России не применяется
n Shigella
n Морфология. Шигеллы имеют форму прямых палочек с закругленными концами, капсул, жгутиков, спор не образуют. Некоторые представители снабжены поверхностными образованиями – фимбриями или ресничками.
|
|
|
n Тинкториальные свойства. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамотрицательны.
Культуральные свойства
n Факультативные анаэробы, растут на простых питательных средах при 37° С. На селективных средах или питательном агаре образуют два типа колоний: S-и R-
n При росте в бульоне гладкие (S) формы образуют равномерное помутнение, шероховатые (R) вызывают образование осадка, надосадочная жидкость остается прозрачной, иногда на поверхности бульона образуется пленка.
Ферментативная активность
Шигеллы обладают малой биохимической активностью: разлагают глюкозу без газообразования, не гидролизуют мочевину, не утилизируют малонат натрия, в среде с глюкозой и аргинином не образуют ацетил-метил-карбинол (отрицательная реакция Фогеса-Проскауэра),, каталазо-положительны, оксидазо-отрицательны. В отношении других признаков могут быть отклонения.
Антигенная структура
n Антигенная структура. Шигеллы обладают групповыми (их обозначают – арабскими цифрами c прописными латинскими буквами) и типовыми (обозначают римскими цифрами (I–VI) термостабильными О- антигенами, а также термолабильными К-антигенами.
n К-антигены имеют все виды шигелл, кроме S. flexneri и S.sonnei
Патогенность для животных
В естественных условиях животные дизентерией не болеют. При парентеральном заражении кроликов у них развивается интоксикация, заканчивающаяся летальным исходом.Морские свинки чувствительны к шигеллам при кератоконъюнктивальном заражении.
Патогенность
n фактор адгезии (фимбрии);
n фактор колонизации – белки наружной мембраны;
n нейраминидаза, гиалуронидаза, муциназа;
n факторы инвазии (интерналины);
n репелленты фагоцитоза (К-АГ, ЛПС);
n энтеротоксины типа LT;
n токсин Шига, или нейротоксин (S. dysenteriae серовар 1) – прямое цитотоксическое действие;
n шигаподобные цитотоксины SLT-I и SLT-II;
n ЛПС – эндотоксин.
Патогенез
|
|
|
n Источник – больные, реконвалесценты и бактерионосители.
n Механизм передачи– фекально-оральный.
n Пути передачи – водный (Флекснера), пищевой (Зонне), контактно-бытовой (S.dysenteriae).
n Входные ворота инфекции – слизистая подвздошной кишки и толстого кишечника.
n Шигеллы активно проникают в эпителиальные клетки слизистой оболочки подвздошной кишки и размножаются в них.
n Через 1–3 дня подвздошная кишка при благоприятном течении болезни освобождается от бактерий, и процесс локализуется в толстой кишке. Возникают дегенеративные изменения клеток, их частичное или полное разрушение, слущивание. Затем шигеллы инфицируют соседние клетки, попадают в подслизистую.
n Размножаясь, шигеллы продуцируют энтеро- и цитотоксины, при разрушении микробов освобождается эндотоксин. Липид А эндотоксина вызывает состояние общей интоксикации организма.
n Угнетение ферментативно-окислительных процессов, нарушение водно-солевого, белкового и других видов обменов приводит к развитию ацидоза и накоплению в организме токсических продуктов. В результате могут развиться тяжелые токсикозы.
n В дальнейшем нарастает воспалительная реакция с развитием дефектов слизистой оболочки. Патоморфологические изменения на территории толстого кишечника (дистальный отдел) проходят последовательно следующие стадии: а) острое катаральное воспаление (гиперемия, отек слизистой, геморрагии, эрозии); б) фибринозно-некротическое воспаление (некроз слизистой); в) образование небольших глубоких язв.
n В кровоток шигеллы попадают достаточно редко (S. dysenteriae серовар I).
n Наиболее поражаемые органы –слизистая, подслизистая и лимфоаппарат кишечника.
n Выведение – с испражнениями.
|
|
|
