Схема микробиологических исследований при коклюше
День исследо-вания
| Материал и метод исследования
|
бактериологический
| серологический
|
Мокрота, слизь из гортани (взятие в катаральный период коклюша)
| Кровь (взятие в спазматический период при затяжных формах коклюша)
|
1 день
| Посев исследуемого материала на плотные питательные среды (среда Борде-Жангу, молочно-кровяной агар с пенициллином, гидролизатно-казеиновая среда, казеиново-угольная среда)
| 1. Реакция связывания комплемента.
2. Реакция пассивной гемагглютинации.
3. Экспресс-диагностика РИФ.
|
3-5 день
| Просмотр посевов. Изучение характера роста. Микроскопия мазков, окрашенный по Граму. Постановка реакции агглю-тинации на стекле с противококлюшной сывороткой.
|
|
| Пересев подозрительных колоний на плотные питательные среды для выделения чистой культуры. Предварительный ответ.
|
|
4-7 день
| Микроскопия мазков, окра-шенных по Граму. Изучение чистой культуры: посев на агар с тирозином, на среду с мочевиной для определения уреазы, постановка ориентировочной и развернутой реакции агглю-тинации.
|
|
5-8 день
| Учет результатов. Окончательный ответ.
|
Самостоятельная работа студентов
1. Бактериоскопия мазков из культуры B. pertussis.
2. Изучение характера роста на плотной питательной среде коклюшных и паракоклюшных бактерий.
3. Ознакомление с препаратами для специфической профилактики и лечения коклюша.
В тетрадь записать схему микробиологических исследований при коклюше.
Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций
Цель занятия: овладеть методами диагностики зоонозных инфекций.
Знать:
- основных возбудителей зоонозных инфекций;
- патогенез заболеваний;
- методы диагностики этих заболеваний.
Уметь:
- оценить результаты бактериологического, серологического и аллергического методов исследования;
- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии данных инфекций.
К зооантропонозным инфекциям относятся заболевания, возбудители которых передаются человеку от животных. Они принадлежат к разным семействам и родам:
- возбудители чумы – Yersinia pestis;
- туляремии – Francisella tularensis;
- бруцеллеза – Bruclla abortus, Brucella melitensis, Brucella suis;
- сибирской язвы – Bacillus anthracis.
Перечисленные бактерии отличаются высокой вирулентностью и вызывают особо опасные инфекционные заболевания.
Работа с данными бактериями проводится в специальных лабораториях с обязательным соблюдением режима безопасности.
В данном методическом руководстве представлены: биология возбудителей, патогенез, методы лабораторной диагностики чумы, туляремии, бруцеллеза и сибирской язвы.
Чума
Возбудитель чумы – Yersinia pestis
Чума представляет собой особо опасное заболевание, которое проявляется в следующих формах:
1) кожно-бубонной,
2) первично – и вторично –септической,
3) первично – и вторично легочной,
4) кишечной.
Раздел
| Вопросы для изучения
|
Биология возбуди-теля
Эпидеми-ология, патогенез заболе-вания
| 1. Таксономия
Род Yersinia содержит 7 видов, среди которых Yersinla pestis – возбудитель чумы.
2. Основные биологические свойства:
Морфологические – грамотрицательные, полиморфные мелкие, неподвижные палочки с закругленными концами. Спор не образуют. В организме больного и при размножении на специальных средах образуют капсулу. Характерной морфологической особенностью является овоидная форма микроба и биполярная окрашиваемость, когда средняя часть клетки почти не окрашивается, а концы окрашены интенсивно.
Культуральные: палочки чумы – факультативные анаэробы размножаются на простых питательных средах. Оптимальная температура для их роста 25-30 градусов. В жидких питательных средах палочки чумы образуют пленку на поверхности, от которой опускаются вниз нити. На плотных средах образуют шероховатые R – формы колонии с неровным краем – “кружевной платочек”.
Биохимические: сбраживают некоторые углеводы с образованием кислоты.
Антигенные свойства: антигенная специфичность иерсиний связана с капсулами (вещество – F1).
Патогенность: палочки чумы очень вирулентны для человека, грызунов (мыши, крысы, суслики и т.д.), для верблюдов. Возбудители чумы образуют токсин, который называется “мышиный яд”.
Источник инфекции – больные чумой грызуны (суслики, мыши, крысы, зайцы и т.д.), верблюды, а также больные люди легочной формой чумы.
Путь передачи – контактный, трансмиссивный (переносчики блохи), алиментарный, воздушно-капельный.
Патогенез
Возбудитель чумы проникает в организм человека через слизистые оболочки, дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, через кожу. В зависимости от вирулентности микроба, места и пути его проникновения, а также состояние организма человека чума может развиваться по-разному, давая различные формы: кожно-бубонную, первично – и вторично легочную и кишечную.
|
Схема лабораторной диагностики при чуме
Материал
| Методы исследования
| Результаты
|
| 1. Бактериоскопический
Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают Граму или водным раствором метиленового синего.
| Грамотрицательные палочки овоидной формы, окрашенные по полюсам.
|
| 2. Бактериологический
Исследуемый материал засеивают на чашки Петри с питательным агаром. Посевы выращи-вают при температуре 25-28о С. Чистую культуру микроба идентифици-руют по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, анти-генным и биохимическим свойствам, чувствитель-ности к чумному бактериофагу.
3. Биологический
Исследуемым матери-алом заражают морских свинок путем втирания в кожу живота.
Экспресс – методы лабораторной диагностики.
1. Имуннофлюоресцен-тный метод
Исследуемый материал наносят на предметное стекло, обрабатывают люминисцентной проти-вочумной сывороткой и учитывают результат с помощью люминис-центного микроскопа.
2. РПГА (реакция пассивной гемаг-глютинации) применя-ется для обнаружения антигенов бактерий чумы в исследуемом материале с помощью стандартной противочумной сыво-ротки, антитела которой нагружены на эрит-роцитах.
| Через 10-12 часов появляются R – формы колонии, в виде “кружевного платочка”.
Иерсинии чумы ферментируют углеводы только до кислоты, индола не образуют, желатин не расщепляют, лизируя чумным бактериофагом агглютинируются диагностическими, иммунными противочумными сыворотками.
На 3-7 день морская свинка погибает, ее вскрывают и делают мазки – отпечатки из паренхиматозных органов.
На темном фоне зеленое свечение возбудителя чумы.
Если реакция положительная, эритроциты склеятся и выпадут в осадок в виде “зонтика”.
При отрицательной реакции эритроциты оседают на дно в виде “пуговки”.
|
Лечение и профи-лактика
| Лечение проводят стрептомицином и противочумным Y-глобу-лином. Специфическую профилактику проводят живой вакциной (штамм EV).
|
|
Вопросы для обсуждения
1. Возбудитель чумы, источник, инфекции, пути передачи, клинические формы.
2. Методы лабораторной диагностики чумы (микроскопический, бактериологический, биологический, ускоренный).
3. Лечение и профилактика чумы.
Воспользуйтесь поиском по сайту: