1. Микроскопия окрашенных мазков с туляремийными бактериями.
2. Постановка и предварительный учет реакции агглютинации (РА) для диагностики туляремии.
3. Техника постановки аллергических проб.
Бруцеллез
Раздел
Вопросы для изучения
Биология возбуди-теля
Эпидеми-ология, патогенез, клиника
1. Таксономическое положение: род Brucella, виды, вызывающие заболевание и у животных и у человека.
B. melitensis, B. suis, B. abortus
2. Морфолого-тинкториальные свойства:
Гр-коккобактерии или короткие палочки, неподвижны.
Спор нет.
Могут образовывать капсулу.
3. Тип дыхания – аэробы.
4. Культуральные свойства: растут на простых питательных средах. Элективными средами являются печеночный бульон и печеночный агар.
5. Биохимические свойства: биохимически инертны, но обладают каталазой и уреазой.
Требователен к СО2 при первой генерации роста, продукции H2S и чувствительности к анилиновым красителям, дифференцируются на виды.
6. Антигены: видоспецифические A, M, G, R дополнительный термостабильный VI-АГ.
7. Факторы вирулентности: капсула (у капсульных штаммов) эндотоксин, гиалуронидаза.
8. Источник инфекции – больной крупно – и мелкорогатый скот, свиньи (от людей передается).
9. Пути передачи: алиментарный, контактно-бытовой.
10. Инкубационный период – 1-3 недели.
11. Это зоонозная инфекция. Относят ее к особо опасным инфекциям, т.к. возбудитель способен проникнуть через неповрежденную кожу и слизистые оболочки.
В клинике преобладает вялое затяжное течение, характерно развитие ГЗТ.
В процессе инфекции формируется перекрестный для разных видов бруцелл, клеточный нестерильный инфекционный иммунитет. Постинфекционный иммунитет недостаточно напряженный.
12. Патогенез: возбудители проникают через кожу, слизистые, желудочно-кишечный тракт и попадают в регионарные лимфоузлы, прорывают лимфатический барьер и выходят в кровь, током крови заносятся в костный мозг, селезенку, почки, печень.
13. Клинические формы: острая и хроническая (хрониосепсис) может быть латентная, по тяжести – тяжелые, легкие, бессимптомные.
Микроби-ологичес-кая диагностика
Иммуно-индика-ция
Аллерги-ческий
Специфи-ческая терапия и профилак-тика
14. Основные методы диагностики:Бактериологический – материал для исследования: кровь, костный мозг, моча (реже ликвор, синовиальная жидкость).
Серологический – РПГА, диагностическая реакция агглютинации (реакция Райта), реакция Кумбса по обнаружению неполных АГ, ориентировочный метод – реакция Агглютинации на стекле Хеддельсона.
РИФ, РИФА, РНАГ.
в/к проба Бюрне с бруцеллином ставится с 1-2 недели заболевания, положительная при хронических, латентных формах и у вакцинированных лиц.
15. Этиотропная терапия: острая форма – лечение сульфаниламидными препаратами и антибиотиками (хлорамфениколом и аминоглюкозидами), хронические формы – иммунотерапия лечебной убитой бруцеллезной вакциной.
16. Специфическая профилактика – активная иммунопрофилактика живой вакциной для создания активно антибактериального нестерильного иммунитета.
Схема микробиологического исследования при бруцеллезе
День
исследования
Метод
Бактериологический
кровь, грудное молоко, желчь, испражнения первые дни лихорадочного состояния.
1 –ый
2 –ой
3 -ий
Посев на печеночный бульон (кровь, молоко) или агар, или в желточный мешок куриного эмбриона. Инкубация в атмосфере с 10% углекислого газа СО2 для выделения (рост 1-4 недели).
Изучение характера роста. Микроскопия колоний. Окраска по Граму. Постановка ориентировочной реакции агглютинации на стекле со специфической агглютинирующей сывороткой. Посев на пестрый ряд. Проведение дифференцировки видов бруцеллы по образованию сероводорода, чувствительности к основному фуксину, тионину и определение их потребности в углекислоте.
Учет ферментативных свойств. Ответ.
Серологический.
Сыворотка крови с 10-12-го дня.
1. Постановка реакции Райта с бруцеллезными диагностикумами.
2. Постановка реакции агглютинации Хеддельсона с концентрированным диагностикумом, окрашенным синькой. Ответ в течение 2-3 мин.
Учет реакции Райта.
Ответ.
Аллергический.
Внутрикожная проба с аллергином (15-20-день болезни).
Введение на ладонную поверхность предплечья 0,1 мл бруцеллина. Учет реакции через 6-8 часов.
Опсонофагоцитарная проба
кровь на 15-20 –й день.
Биологический
Заражение мышей или морских свинок в паховую область. Вскрытие через 20-30 дней, проведение бактериологического исследования.
Вопросы для обсуждения
1. Режим работы с особо опасными микроорганизмами.
2. Биологическая характеристика бруцеллеза.
3. Лабораторная диагностика бруцеллеза.
4. Специфическая профилактика бруцеллеза.
Самостоятельная работа
1. Микроскопия окрашенных мазков с бруцеллами.
2. Постановка и учет реакции Райта и Хеддельсона.
3. Техника постановки аллергических проб для диагностики бруцеллеза.
4. Изучение препаратов, применяемых для диагностики, лечения и профилактики бруцеллеза.
Постановка реакции Райта (схема)
Компонент
Контроль сыворотки
Контроль
диагностикума
Физиологический раствор
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
Сыворотка больного в разведении 1:25
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
Бруцеллезный диагностикум (мл)
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
0,5
Окончательное раз-ведение сыворотки
1:50
1:100
1:200
1:400
1:80
Заключение:
ВОЗБУДИТЕЛИ РАНЕВЫХ ИНФЕКЦИЙ. ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ СТРУКТУРА. ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ. МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: ОСОБЕННОСТИ ВЗЯТИЯ, ХРАНЕНИЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ. ОБЩАЯ СХЕМА БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ РАНЕВОЙ ИНФЕКЦИИ
Цель занятия:
– освоить принципы диагностики раневой инфекции;
– знать биологию возбудителей;
– причину возникновения раневой инфекции;
– освоить лабораторную диагностику.
Уметь:
– интерпретировать полученные результаты бактериологического исследования раневого отделяемого;
– оценить данные антибиотикограммы;
– назначить соответствующую терапию.
Раневая инфекция – процесс, возникающий в ране вследствие инвазии в нее патогенной микрофлоры при условии недостаточности защитных реакций поврежденных тканей. Инфекция развивается при инфицировании раны вирулентными, особенно госпитальными, штаммами, в окружающих тканях развивается гнойная инфекция.
Инфицирование операционной раны чаще всего вызывается золотистым стафилококком, кишечной и синегнойной палочками, протеем, клебсиеллами.
Внегоспитальные раны (боевые, производственные, бытовые) инфицируются в момент ранения и после него. Микробы в них проникают с ранящим оружием, кусочками одежды, почвы, пыли, кожи. Кроме перечисленных в эти раны также возбудители гнойной анаэробной инфекции – клостридии.
Раздел
Вопросы для изучения
Этиологичес-кая структура раневой инфекции
Аэробы и факультативные анаэробы:Кокки:
St. aureus
St. epidermidis
Strep. pyogenes
Enterococcus
Палочки:
Escherichia
Klebsiella
Proteus
Pseudomonas
Анаэробы:
Clostridium perfringens
Cl. septicum
Cl. hystolyticum
Cl. tetani
Bacteroides
Peptococcus
Peptostreptococcus
Биология
возбудителя
Патогенез
Иммунитет
Лабораторная диагностика
Лечение
Профилакти-ка
Аэробные представители – см. методические пособия по кишечным инфекциям и коккам
Анаэробы:
Бациллы, образующие овальные или круглые споры, располагающиеся терминально, центрально или субтерминально.
Clostridium perfringens – толстая, неподвижная палочка, образует капсулу.
Тинкториальные свойства – грамположительна.
Культуральные свойства – анаэроб.
Биохимические свойства: ферментирует:
лактоза, сахароза до КГ.
Створаживает молоко за 3-5 часов.
Разжижает желатин.
Вирулентность: экзотоксин – гемолизин, некротоксин, летальный токсин, а также ферменты “агрессии”– гиалуронидаза, лецитиназа.
Антигенные свойства: 6 серологических типов: A, B, C, D, E, F.
Clostridium novyi– полиморфная палочка (перитрих).
На жидких средах образует осадок.
Биохимическая активность: расщепляет глюкозу до Г.
Молоко свертывает медленно. Разжижает желатин.
Вирулентность: экзотоксин – летальные, некротические свойства, отечный и гемолитический токсин.
Антигенное строение: A, B, C серотипы
Clostridium septicum:тонкая, длинная полиморфная палочка.
Грамположительная.
Перитрих.
Культуральные свойства – равномерное помутнение среды.
Ферментирует глюкозу мальтозу до К и Г.
Вирулентность: экзотоксин с летальными, гемолитическими, некротическими свойствами.
Clostridium hystolyticum
Палочка, перитрих, споры расположены субтерминально или центрально.
Культуральные свойства: равномерное помутнение среды. Углеводы не ферментирует. Молоко не пептонизирует
Гидролизует желатин.
Вирулентность: экзотоксин с некротическими, летальными и гемолитическими свойствами. Сильное протеолитическое действие.
Характерен прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование в тканях и отравление токсинами возбудителя и продуктами распада тканей.
Клостридии – некропаразит, благоприятной средой для его размножения служат мертвые и поврежденные ткани.
В патогенезе различают 2 стадии:
1) образование отека;
2) развитие газовой гангрены.
Антитоксический.
Цель исследования:
– доказать наличие возбудителя;
- доказать наличие экзотоксина.
Методы диагностики:
1. Микроскопический.
2. Бактериологический.
3. Биологический.
– антибиотики;
– антитоксические иммунные сыворотки;
– специфический иммуноглобулин.
Активная: анатоксин
Пассивная: антитоксические сыворотки