 |
Паратуберкулез. (болезнь Ионе). Резюме. А. Введение
|
|
|
|
NB: Версия принята Всемирной ассамблеей делегатов МЭБ в мае 2014 г.
ГЛАВА 3. 1. 11.
ПАРАТУБЕРКУЛЕЗ
(Болезнь Ионе)
РЕЗЮМЕ
Паратуберкулез (болезнь Ионе) – это хронический энтерит жвачных животных, вызываемый патогеном Mycobacterium avium подвида paratuberculosis (MАР).
Идентификация агента: Диагностика паратуберкулеза делится на две части: диагностика клинической болезни и обнаружение субклинической инфекции. Последнее важно для борьбы с болезнью на уровне фермы, а также на национальном или международном уровне.
Диагноз паратуберкулез ставят на основании клинических признаков и подтверждают демонстрацией MАР в фекалиях с помощью микроскопа или с использованием ДНК-зондов и полимеразной цепной реакции. Диагноз ставят при вскрытии в результате обнаружения характерных для данной болезни поражений в кишечнике, либо путём демонстрации типичных кислотоустойчивых организмов в мазках-отпечатках, либо с использованием гистологических методов, или путём выделения MАР в культуре.
Обнаружение субклинической инфекции зависит от выделения специфических антител серологическими методами или культивирования MАР из фекалий или тканей, собранных при аутопсии, или демонстрации клеточно-опосредованных реакций. Выбор теста зависит от обстоятельств и степени чувствительности, необходимой на уровне отдельного животного или стада.
Культуры MАР можно получить из фекалий или тканей после обработки с целью устранения контаминантов путём высева в искусственные среды со специфическим фактором роста микобактином, который важен для роста MАР.
Серологические исследования: Борьба с паратуберкулезом является трудной задачей из-за продолжительного течения инфекции, преимущественно субклинической природы болезни и нехватки тестов для точного выявления субклинически инфицированных животных.
|
|
|
К серологическим исследованиям, которые обычно используются для диагностики паратуберкулеза у крупного рогатого скота, относятся иммуноферментный анализ (ИФА), реакция связывания комплемента (РСК), и реакция иммунодиффузии в агаровом геле (AGID). Чувствительность и специфичность часто определяют по результатам культивирования в фекалиях, которое само по себе обладает неизвестной чувствительностью у субклинически инфицированного крупного рогатого скота. Некоторые тесты, например, ИФА, показывают очень хорошие результаты, если используются с целью подтверждения диагноза паратуберкулез у коров с типичными клиническими признаками.
Исследования на наличие клеточно-опосредованного иммунитета : Используются анализ высвобождения гамма-интерферона и реакция гиперчувствительности замедленного типа (кожная проба), но интерпретация в обоих случаях затруднительна.
Требования к вакцинам и диагностическим биологическим препаратам: Вакцины против паратуберкулеза могут быть живыми аттенуированными или убитыми бактериями, либо инкорпорированными с помощью адъюванта, либо лиофилизированными и затем адъювантированными при восстановлении. Определение количества бактерий затруднено, поэтому содержание бактерий в вакцине можно определить по весу, тогда как об иммуногенности вакцины можно судить по серийному тестированию партии на сенсибилизирующие способности у морских свинок.
Безопасность вакцин или аномальную токсичность можно также исследовать на морских свинках.
Для проведения диагностических кожных проб используется джонин и птичий туберкулин – очищенные белковые продукты подвергшихся термообработке культур MАР или M. avium, соответственно. Джонин стандартизируют по содержанию очищенных белковых продуктов с использованием химического анализа, а его биологическую активность идентифицируют в морских свинках, сенсибилизированных MАР. Активность птичьего туберкулина устанавливают на морских свинках, сенсибилизированных с помощью M. avium, путём сравнения с референтным препаратом, откалиброванным в международных единицах.
|
|
|
А. ВВЕДЕНИЕ
Возбудитель Mycobacterium avium подвида paratuberculosis (MАР) – это организм, впервые обнаруженный Ионе и Фротингэм в 1895 году. MАР вызывает паратуберкулез или болезнь Ионе, кишечную гранулематозную инфекцию (Thorel et al., 1990). Паратуберкулез чаще всего выявляют у домашних жвачных животных (КРС, овцы, козы, верблюдовые и буйволы), а также у диких жвачных животных (оленевых). Он распространён во всём мире. Болезнь также регистрировали у лошадей, свиней, кроликов, горностаев, лисиц и ласок (Greig et al., 1999). В естественных условиях болезнь у крупного рогатого скота распространяется путём попадания MАР в органы пищеварения из контаминированной окружающей среды. Болезнь персистирует после введения инфицированных животных в стадо. Инфекция может распространяться вертикально на плод (Larson & Kopecky, 1970); сперма также может быть инфицирована этим организмом (Sweeney et al., 1995). Главным источником инфекции для телят является молоко от инфицированных коров или молоко, контаминированное фекалиями больного скота.
Идентификация возбудителя МАР базируется на его потребности в микобактине и его связи с клиническими признаками, и определенных лабораторных результатах, например культивирования или ПЦР. Зависимость от микобактина в течение длительного времени считалась таксономической характеристикой МАР, так как большинство микобактерий способно вырабатывать микобактин для себя. Однако МАР, M. silvaticum и некоторые первичные изоляты M. avium не обладают такой способностью и требуют выращивания микобактина в лаборатории. Таким образом, потребность в микобактине присуща не только МАР; эта характеристика присутствует в различной степени в группе M. avium.
Клиническими признаками паратуберкулеза являются медленно прогрессирующее истощение и диарея, которая сначала носит перемежающийся характер, постепенно становится более тяжёлой, а затем уже присутствует у крупного рогатого скота постоянно. Диарею также регистрируют как клинический признак у выращиваемых на ферме оленей. Диарея менее характерна для мелких жвачных животных.
|
|
|
Ранние поражения возникают на стенках тонкого кишечника и в дренирующих брыжеечных лимфатических узлах, и на данном этапе инфекция ограничивается этими участками. По мере прогрессирования болезни макроскопические поражения возникают в подвздошной кишке, тонкой кишке, конечной части тонкого кишечника, слепой кишке и ободочной кишке, а также в брыжеечных лимфатических узлах. МАР присутствует в поражениях, и, в конечном итоге, во всем теле. Поражения в кишечнике являются причиной утечки белка и возникновения синдрома пониженного всасывания белка, что ведёт к истощению мышц. Клинические признаки обычно впервые появляются у молодых животных на стадии взросления, но болезнь может также иметь место у животных старше 1 – 2 лет, а у молочного скота ее часто отмечают у животных в возрасте 3 – 5 лет.
В течение нескольких недель инфекции в стенках тонкого кишечника начинается фаза размножения возбудителя МАР. В зависимости от резистентности отдельного животного эта инфекция или исчезает, или животное остаётся инфицированным как здоровый носитель. Процент животных этих категорий неизвестен. Более поздняя стадия размножения организмов в носителях ведёт к расширению поражений, вмешательству в обмен веществ в кишечнике и появлению клинических признаков болезни. Субклинические носители выделяют с фекалиями разные количества МАР. В большинстве случаев по мере развития клинической формы болезни выделяется всё большее количество организмов.
Клеточно-опосредованные иммунные реакции поддаются обнаружению на ранних стадиях инфекции и продолжают присутствовать у части субклинически инфицированных носителей, но по мере развития болезни клеточно-опосредованные иммунные реакции ослабевают и могут отсутствовать в клинических случаях. Сывороточные антитела обнаруживаются на более поздних сроках по сравнению с клеточно-опосредованными иммунными реакциями. Они могут также присутствовать у носителей, которые перенесли инфекцию. Сывороточные антитела присутствуют более постоянно и приобретают более высокий титр по мере того, как поражения становятся более обширными, отражая количество присутствующего антигена. У овец может наблюдаться серологический ответ, который более вероятно будет выявлен при мультибактериальной, чем при олигобациллярной форме болезни.
|
|
|
Другие микобактериальные болезни и инфекции, включающие туберкулёз млекопитающих и птиц, тоже вызывают клеточно-опосредованные иммунные реакции и выработку сывороточных антител. Отсюда следует, что эти болезни необходимо дифференцировать от паратуберкулеза как клинически, так и с помощью специфических диагностических тестов. Заражение сапрофитными микобактериями из окружающей среды также может стать причиной чувствительности сельскохозяйственного скота, приводя к неспецифическим клеточно-опосредованным иммунным реакциями.
Животные, вакцинированные против паратуберкулеза, вырабатывают и клеточно-опосредованные иммунные реакции, и сывороточные антитела. Вакцинация – это помощь в предотвращении клинической болезни, но она необязательно предупреждает инфекцию. Она также служит препятствием при выполнении программ по диагностике и борьбе с туберкулёзом крупного рогатого скота. Таким образом, если необходимо диагностировать инфекцию у вакцинированных животных, можно использовать только тесты по обнаружению МАР в образцах фекалий или тканей.
У отдельных животных, особенно из хозяйства, где болезнь ранее не регистрировалась, предварительный клинический диагноз может быть подтверждён с помощью лабораторных тестов. Однако окончательный диагноз может быть поставлен только на
основании клинических признаков, если эти клинические признаки являются типичными для данной болезни, и если известно, что эта болезнь присутствует в стаде. Подтверждение паратуберкулеза зависит от обнаружения или макроскопических поражений с демонстрацией типичных кислотоустойчивых организмов в мазках-отпечатках, или микроскопических патогномоничных поражений и выделения в культуре МАР.
МАР классифицируется как Группа риска 2 инфицирования человека, и с возбудителем следует обращаться при соблюдении надлежащих мер, описанных в Главе 1. 1. 4. Биозащита и биобезопасность: Стандарт управления биологическим риском в ветеринарной лаборатории и в виварии. Меры по биологическому сдерживанию должны быть определены анализом риска, как описано в Главе 1. 1. 4.
|
|
|
