 |
3.2. Гиперчувствительность замедленного типа
|
|
|
|
3. 2. Гиперчувствительность замедленного типа
Несколько ИФА тест-систем, доступные в продаже, предназначены для количественного определения гамма интерферона в плазме КРС, овец и коз 5
Кожная проба на определение гиперчувствительности замедленного типа – это измерение опосредованного клетками иммунитета, но с более низкой эффективностью. Тест проводят путём внутрикожного введения 0, 1 антигена в остриженный или выбритый участок, обычно сбоку средней трети шеи. В прошлом с этой целью использовали 0, 1 мл очищенного белкового деривата птичьего туберкулина или джонина, так как считалось, что птичий туберкулин и джонин обладают сравнимой чувствительностью и специфичностью. Толщину кожи измеряют с помощью кронциркуля до прививки и через 72 часа после неё. Увеличение толщины кожи более чем на 2 мм следует считать индикатором присутствия гиперчувствительности замедленного типа. Следует отметить, что положительные реакции у оленей могут проявляться в виде рассеянных бляшек, а не отдельных ограниченных опухолей, а это затрудняет оценку результатов теста. У этого вида животных наличие любой опухоли следует считать положительным результатом. Однако повышение чувствительности к M. avium комплексу широко распространено среди животных, и ни птичий туберкулин, ни джонин не являются высокоспецифичными. Более того интерпретация кожных проб осложнена недостатком согласованности критериев интерпретации. В исследовании, в котором для исследования КРС использовался джонин, специфичность кожной пробы составляла 88, 8% при пороговой величине ≥ 2 мм, 91, 3% при пороговой величине ≥ 3 мм и 93, 5% при пороговой величине ≥ 4 мм (Kalis et al., 2003). Влияние этих пороговых величин на чувствительность не было определено. На эффективность этого теста серьезное влияние также может оказать незначительные антигеновые различия, которые возникают в различных партиях антигена (Kalis et al., 2003). Необходимо проводить дальнейшие исследования для повышения эффективности кожной пробы.
|
|
|
С. ТРЕБОВАНИЯ К ВАКЦИНАМ И ДИАГНОСТИЧЕСКИМ БИОЛОГИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ
С1. Вакцины
1. Справка
Вакцины, применяемые против паратуберкулеза, включали: живые, аттенуированные, с маслом и пемзой; лиофилизированные, живые, аттенуированные, в которые после восстановления могут вводиться адъюванты, например, масло; и инактивированные высокими температурами бактерины. Основным преимуществом вакцинации является профилактика клинических случаев. Вакцинация может стать причиной возникновения реакции в месте инъекции. Также вакцинация может стать помехой для программ искоренения, основанных на иммунологическом тестировании и уничтожении животных с выявленной инфекцией, а также интерпретации реакции замедленного типа на кожные пробы при исследовании на туберкулез КРС. Все доступные вакцины сейчас являются цельноклеточными.
Руководства по производству ветеринарных вакцин приводятся в Главе 1. 1. 8. Принципы производства ветеринарных вакцин. Руководства, приведенные здесь и в Главе 1. 1. 8, являются по своей природе общими, и могут быть дополнены национальными и региональными руководствами.
2. Описание производства и минимальные требования к вакцинам
2. 1. Характеристики посевного материала
2. 1. 1. Критерии качества
Исследования на чистоту должны проводиться на посевных культурах и итоговых клетках посредством окрашивания мазков.
2. 1. 2. Валидация в качестве вакцинного штамма
Посевные штаммы должны быть доминирующего типа, которые можно проверить с использованием биотипирования или генетического анализа. Они должны быть безвредными при введении рекомендуемым способом вакцинации соответствующим видам целевых животных.
|
|
|
2. 2. Метод производства
2. 2. 1. Процедура
Для производства вакцин организмы можно выращивать на жидкой синтетической среде, такой как синтетическая среда Reid. Организмы растут в виде плёнки на поверхности жидкости. С целью обеспечения хорошей площади поверхности удобно использовать такие сосуды, как конические колбы, содержащие жидкую среду на одну треть их номинального объёма. Эти колбы можно засевать непосредственно с картофельных скошенных культур, но при использовании некоторых штаммов могут потребоваться один или несколько пассажей на жидкой среде для обеспечения адекватного роста плёнки для окончательного серийного пассажа. Такое пассирование должно проводиться с 2-недельными интервалами, так как более длительные периоды могут привести к перезреванию и опусканию плёнки. Инкубацию следует проводить при 37º С.
Чтобы приготовить вакцину, плёнку, выращенную из 2-недельных культур каждого штамма, следует отделить от жидкой среды путём декантирования, фильтрации и сдавливания между двумя прокладками из фильтровальной бумаги. Влажную культуру МАР смешивают с адъювантом, таким как жидкий парафин, оливковое масло и пемза.
|
|
|
