Аспирационный метод. Приложение №2. Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений лечебных учреждений в зависимости

Аспирационный метод

 В этом методе используется принцип ударной струи воздуха, получаемый с помощью аппарата Кротова или других установок (ПУ-1Б). Порядок работы и механизм улавливания микрофлоры воздуха следующие:

1) Открывают крышку прибора и устанавливают на вращающийся столик чашу Петри с питательной средой. Закрывают крышку и включают прибор.

2) После установления поплавка ротаметра на заданной величине объема засеваемого воздуха начинают счет времени. Струя воздуха, проходя через узкую клиновидную щель, с большой скоростью ударяется о влажную поверхность питательной среды, и к ней прибиваются и прилипают частицы и капли, содержащие бактерии. Равномерное обсеменениеповерхности чашек достигается вращением столика, на котором находится чашка с питательной средой. Скорость вращения столика устанавливают специальным винтом.

3) После посева необходимого объема воздуха, равного произведению показателя ротаметра на время, выключают прибор, открывают крышку, после остановки столика берут чашку со средой, закрывают крышку и помещают в термостат на двое суток с последующим выдерживанием при комнатной температуре в течение 2 суток.

4) На МПА определяют ОМЧ, на кровяном агаре - наличие стрептококков, на среде Эндо – бактерии кишечной группы, на ЖСА – стафилококки, на среде Сабуро – грибы.

5) Для определения ОМЧ исследуют 100 л воздуха, для выявления стафилококков, стрептококков, энтеробактерий и грибов – 250 л воздуха.

6) Расчет количества микроорганизмов в 1 м³ воздуха проводят по формуле:

К = N х 1000 / V х t,

где N – количество колоний на 1 чашке, V - скорость просасывания воздуха (м³/мин), t - время отбора пробы в минутах.

 

Приложение №2

Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений лечебных учреждений в зависимости

от функционального назначения и класса чистоты

(Согласно СанПиН 2. 1. 3. 1375-03 «Гигиенические требования к размещению, оборудованию и эксплуатации больниц, родильных домов и других лечебных стационаров»)

 

			Санитарно-микробиологические показатели
№ п/п	Класс чистоты	Название помещения	Общее количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха (КОЕ/м3)			Количество колоний стафилококка золотистого в 1 м3 воздуха (КОЕ/м3)		Количество плесневых и дрожжевых грибов в 1 м3 воздуха (КОЕ/м3)
			до начала работы	во время работы	до начала работы		во время работы	до начала работы	во время работы
1.	Особо чистые (А)	Операционные, родильные залы, асептические боксы для гематологических, ожоговых пациентов, палаты для недоношенных детей, асептический блок аптек, стерилизационная (чистая половина), боксы бактериологических лабораторий	Не более 200	Не более 200	не должно быть		Не должно быть	не должно быть	не должно быть
2.	Чистые (Б)	Процедурные, перевязочные, предоперационные, палаты и залы реанимации, детские палаты, комнаты сбора и пастеризации грудного молока, ассистентские и фасовочные аптек, помещения бактериологических и клинических лабораторий, предназначенные для проведения исследований	Не более 500	Не более 750	Не должно быть		Не должно быть	Не должно быть	Не должно быть
3.	Условно чистые (В)	Палаты хирургических отделений, коридоры, примыкающие к операционным, родильным залам, смотровые, боксы и палаты инфекционных отделений, ординаторские, материальные, кладовые чистого белья	Не более 750	Не более 1000	Не должно быть		Не более 2	Не должно быть	Не должно быть
4.	Грязные (Г)	Коридоры и помещения административных зданий, лестничные марши лечебно-диагностических корпусов, санитарные комнаты, туалеты, комнаты для грязного белья и временного хранения отходов	Не нормируется		Не нормируется			Не нормируется

 

 

Приложение №3

Методы определения количества бактерий

на жидких и плотных питательных средах

 Определение количества бактерий в объектах внешней среды производится, как правило, путем количественного посева на среды. В случае незначительного микробного обсеменения объекта делается высев цельного материала. При массивном обсеменении необходимо делать разведения, из которых производится высев на среды. Для приготовления разведений берут ряд пробирок, в каждой из которых содержится 9 мл физиологического раствора. В первую пробирку вносят 1 мл исследуемого материала (получают разведение 10^-1), тщательно перемешивают путем многократного заполнения пипетки и переносят 1 мл во вторую пробирку (получают разведение 10^-2) и т. д.

Посев по Коху

 Метод Коха используется для определения общего количества бактерий. В пустую стерильную чашку Петри наливают 1 мл исследуемого материала из соответствующего разведения и заливают 10 - 15 мл расплавленного и остуженного до 45 ⁰С МПА, смешивают с жидкостью, вращая чашку на поверхности стола.

 После культивирования посевов производится подсчет колоний, выросших на поверхности и в глубине агара. Для этого чашку кладут вверх дном на черный фон, каждую сосчитанную колонию отмечают маркером по стеклу. Оценивают только те чашки, на которых выросло от 30 до 300 колоний. Если на чашке выросло более 300 колоний, а анализ нельзя повторить, то допускается подсчет колоний при сильном боковом освещении при помощи лупы и специальной пластинки с сеткой.

 Подсчитывается количество колоний не менее чем в 20 квадратах площадью 1 см² в разных местах чашки. Рассчитывается среднее количество колоний в 1 см², которое умножается на площадь чашки.

 При подсчете колоний может быть использован специальный прибор счета бактерий – ПСБ.

 Результат подсчета колоний в каждой чашке - количество бактерий на 1 мл (см³) или 1 г исследуемого материала с учетом разведения. За окончательное количество бактерий принимают среднеарифметическое результатов подсчета колоний на чашках с посевом двух соседних разведений.

 Пример: разведение 10^-1 - 250 колоний, разведение 10^-2 - 23 колонии.

Общее количество бактерий = 250 х 10 + 23 х 100 / 2 =2400 кое/мл = 2, 4 х 10² кое/мл (колониеобразующих единиц на 1 мл).

Результат исследований может быть округлен до 2 - 3 значащих цифр.

 

⇐ Предыдущая28293031323334353637Следующая ⇒

Поделиться:

Воспользуйтесь поиском по сайту: