 |
Нежелательное спаривание сук
|
|
|
|
Гари С.В. Ингленд
Введение
Нежелательное спаривание часто встречаемая клиническая проблема в ветеринарной практике. Ее большая частота, возможно, обусловлена продолжительным периодом эструса, во время которого сука допускает кобеля к спариванию и может активного искать его. Во многих случаях владелец может быть не уверен произошло ли спаривание, и тщательное обследование суки, включая сбор материала для цитологического исследования, может быть необходимо, чтобы подтвердить его подозрения.
Доступно несколько методов, чтобы предотвратить рождение щенков, и они могут быть разделены на такие, которые предотвращают или мешают имплантации зародышей, которые нарушают нормальный гормональный фон и вызывают рассасывание плодов или аборт, и которые оказывают прямое эмбриотоксическое действие.
Выбор наиболее подходящего средства будет зависеть от фактора риска наступления беременности, временного интервала между возможным спариванием и ветеринарным осмотром и возможных побочных эффектов выбранных средств.
Физиология размножения
Проэструс характеризуется повышением уровня эстрогенов в плазме крови, которые вызывают опухание вульвы и появление серозно-кровянистых выделений из влагалища. Эстрогены также способствуют выделению специальных феромонов, которые ответственны за привлечение самцов. Во время проэструса сука не допускает самцов к спариванию, но может высказывать повышенную восприимчивость к ним. Этот период длиться приблизительно 7 дней, хотя его продолжительность может значительно колебаться. Во время проэструса эстроген оказывает отрицательный обратный эффект на высвобождение гонадотропинов из гипофиза; концентрации фолликулостимулирующего (ФСГ) и лютеинизирующего (ГТГ) гормонов уменьшается по сравнению с поздней стадией анэструса. Во время эструса сука демонстрирует характерное поведение по отношению к самцам, включая отведение хвоста и демонстрацию вульвы и промежности. Сука будет принимать стойку для спаривания. Этот период длиться приблизительно 7 дней. Начало эструса ассоциировано со снижением уровня эстрогенов в плазме крови и в то же время продукцией прогестеронов. У сук имеется особенность, прогестерон у них продуцируется в низких концентрациях при лютеинизации фолликула до овуляции. Это понижение уровня эстрогенов и повышение уровня прогестеронов, ответственно за стимуляцию повышения как ФСГ, так и ЛГ. Овуляция первичных ооцитов происходит через 2 дня после всплеска уровня ЛГ, а ооциты становятся оплодотворяемыми через 3-5 дней после овуляции. У лабораторных собак начало эструса часто возникает одновременно с преовуляторным всплеском уровня ЛГ. Таким образом, пик фертильности может ожидаться в течение 11-14 дней после начала проэструса. Однако это не всегда так, и у сук внутри репродуктивного тракта могут находиться готовые к оплодотворению яйцеклетки как через 4 дня, так и через 30 дней после начала проэструса. Эта большая разница важна, так как возможность забеременеть не может быть исключена просто путем оценки времени спаривания по отношению к клиническим и поведенческим характеристикам, показываемым сукой. Кроме того, многие владельцы точно не знают, когда начался проэструс.
|
|
|
Во время сбора анамнеза очень важно выяснить временной интервал между предполагаемым спариванием и ветеринарным осмотром суки, так как это может влиять на выбор назначаемого лечения.
Обследование суки после предполагаемого нежелательного спаривания
Хотя понятно, что “слепое” лечение всех сук, которые, как подозревается, имели нежелательное спаривание, при определенных обстоятельствах может быть подходящим, все же возможные побочные эффекты любого лечения должны быть учтены. Более правильный подход – это тщательное обследование сук и назначение лечения, соответствующего случаю.
|
|
|
Клинический осмотр сук должен включать: получение влагалищного мазка для определения стадии эстрального цикла и чтобы попытаться определить наличие сперматозоидов; использование модифицированных методик исследования вагинального мазка, чтобы определить наличие сперматозоидов; определение уровня прогестерона в плазме крови, чтобы точно установить стадию эстрального цикла.
Цитология влагалищного мазка
Сбор слущенных влагалищных клеток и изучение морфологии эпителиальных клеток наряду с оценкой количества белых и красных кровяных телец помогает установить стадию эстрального цикла. Эти результаты должны использоваться в сочетании с определением уровня прогестерона в плазме крови (смотрите ниже). Клетки влагалища проще всего собирать либо аспирацией из передней части влагалища с помощью короткой пипетки для осеменения КРС, прикрепленной к шприцу объемом 5 мл, либо путем проведения влажным ватным тампоном по стенке влагалища. После того как материал собран, клетки помещаются на предметное стекло и окрашиваются с помощьюDiff-Quik ® или модифицированной Wright-Giems краски.
У недавно повязанных сук в мазке из влагалища могут быть обнаружены сперматозоиды. Однако количество сперматозоидов быстро уменьшается, и они могут не обнаруживаться, если после спаривания прошло больше 24 часов.
Суки, у которых цитологически обнаружен проэструс (в этом случае уровень прогестерона в плазме низкий) могут быть не спаренными, так как в этот период они обычно не допускают спаривания. Это не всегда так, и некоторые ранние спаривания могут приводить к наступлению беременности, если сперматозоиды могут оставаться жизнеспособными внутри репродуктивных органов самки до наступления овуляции. В этих случаях необходимо выявление наличия или отсутствия сперматозоидов.
Суки, у которых цитологически обнаружено, что они находятся в состоянии эструса (в этом случае уровень прогестерона в плазме обычно средний или высокий) могли быть спарены, и в большинстве случаев должны получить лечение, хотя ссылка на наличие или отсутствие сперматозоидов может повлиять на лечение выбора.
|
|
|
Суки, у которых цитологически обнаружено, что они находятся в состоянии метэструса (диэструса) (в этом случае уровень прогестерона в плазме высокий) могли быть спарены. Они должны быть исследованы на наличие сперматозоидов; однако наиболее важный фактор – это временной интервал от спаривания до обследования, так как это редкое явление, когда спаривание, происходящее после начала цитологического метэструса (диэструса), является фертильным.
Определение уровня прогестерона в плазме
Уровень прогестерона в плазме может быть определен путем радиоиммуноанализа, но эта методика трудоемкая, дорогая и часто дает задержанные результаты. Недавно стали доступны несколько методик твердофазных иммуноферментных анализов (ELISA). Наборы для ELISA позволяют определить уровень прогестерона либо количественно, либо качественно в течение 45-60 минут после сбора пробы.
У сук, уровень прогестерона в плазме низкий во время анэстурса и проэструса. Его уровень повышается, когда возникает преовуляторная лютеинизация фолликула, а после этого имеется быстрый подъем уровня прогестерона после овуляции. Уровень прогестерона должен интерпретироваться в свете клинического анамнеза и оценки цитологии влагалищного мазка.
Обнаружение сперматозоидов во влагалище
Методика изучения цитологии мазка из влагалища ненадежна для обнаружения сперматозоидов, если интервал между спариванием и ветеринарным осмотром превышает 24 часа. После этого времени сперматозоиды присутствуют только в небольшом количестве, и многие сперматозоиды будут разрушены и определяться только по наличию головки.
Точное обнаружение сперматозоидов требует модифицированных методов. Тампон, смоченный в солевом растворе, должен быть помещен во влагалище на 1 минуту. После чего кончик тампона помещают в маленькую пробирку с 0,5 мл физиологического раствора, и оставляют на 10 минут. Затем тампон выжимают досуха, а пробирку, содержащую солевой раствор центрифугируют со скоростью 2000 оборотов в минуту 10 минут. Сбор осадка и микроскопическое исследование после окрашивания модифицированной Wright-Giemsa краской позволяет определить головки сперматозоидов. С помощью этой методики сперматозоиды обнаруживаются в 100 % проб, после спаривания, произошедшего в течение предыдущих 24 часов, и в 75 % проб после спаривания, произошедшего в течение предыдущих 48 часов.
|
|
|
Способы лечения
Имеется несколько способов лечения, даже когда спаривание произошло в момент, когда наиболее вероятно зачатие. Если суку не используют в разведении, самым простым решением будет провести овариогистеэктомию после окончания эструса. Второй способ это лечить суку, чтобы попытаться предотвратить имплантацию зародышей, тогда как третий способ это подождать до момента, когда можно поставить положительный диагноз на беременность, прежде чем начать лечение. Последний способ требует обследования суки (обычно с помощью диагностического ультразвукового исследования в B-режиме) приблизительно через 28 дней после спаривания. Если беременность установлена, ее можно прервать путем стимулирования резорбции плодов или вызывания аборта после этого времени.
Способы лечения должны рассматриваться в зависимости от риска наступления зачатия (таблица 9.1)
Таблица 9.1 Риск наступления зачатия у сук, которые предположительно были спарены.
* Риск должен рассматриваться относительно временного интервала между возможным спариванием и ветеринарным осмотром. В случаях с низким риском животное может быть исследовано через 28 дней после “спаривания”, чтобы установить наличие беременности, и если диагноз положительный, беременность можно прервать в это время.
| Наличие сперматозоидов во влагалище | Уровень прогестерона в плазме | Цитологическое исследования влагалищного мазка | Риск наступления зачатия* |
| Нет | Низкий | Проэструс | Низкий |
| Нет | Низкий | Эструс | Низкий |
| Нет | Средний/высокий | Эструс | Средний |
| Нет | Высокий | Метэструс | Низкий |
| Да | Низкий | Проэструс | Низкий |
| Да | Низкий | Эструс | Средний |
| Да | Средний/высокий | Эструс | Высокий |
| Да | Высокий | Метэструс | Низкий |
Предотвращение имплантации зародышей
Эстрогены
Эстрогены использовались в течение нескольких лет для предотвращения нежелательной беременности у нескольких видов. Считалось, что механизм их действия заключается в том, что они нарушают время продвижения зиготы и препятствуют имплантации зародыша. Интересно, что ранний лютеолизис отмечен у некоторых беременных сук, леченных эстрогенами во время эструса, эффект, который может быть опосредован либо прямо посредством секреции лютеального прогестерона, либо путем блокирования ЛГ, который является лютеотрофным.
|
|
|
В клинической практике в Объединенном Королевстве, широко использовали диэтилстилбоэстрол, чтобы предотвращать зачатие, хотя этот препарат был замещен использованием эстрадиола бензоата. В других странах широко использовали эстрадиола ципионат и тестранол. Подкожное введение силастиковых капсул, содержащих эстрадиол, во время середины беременности, стимулировало резорбцию плодов или аборт, преимущественно из-за лютеолитического действия.
Только эстрадиола бензоат разрешен для лечения нежелательного спаривания в Объединенном Королевстве. Этот препарат может назначаться однократно в относительно высокой дозе в течение 4 дней после спаривания, или в низких дозах, используя повторяющиеся введения на 3 и 5 день (и возможно также на 7 день) после спаривания. Обе схемы показали себя эффективными; схема с низкими дозами была предложена в попытках снизить возможные побочные действия.
Эстрогены могут потенцировать стимулирующий эффект прогестерона на матку, вызывая развитие кистозной гиперплазии эндометрия. Они также вызывают расслабление шейки матки, таким образом, позволяя бактериям из влагалища попадать в матку. Эти два процесса могут приводить к развитию пиометры. Эстрогены также способствуют развитию дозозависимой супрессии костного мозга, а токсическая доза для отдельной особи может лежать в терапевтических границах. Другие менее серьезные эффекты включают алопецию, гиперпигментацию кожи и увеличение молочных желез и вульвы.
Имеется некоторое беспокойство, что схема с низкими дозами эстрогенов для лечения нежелательного спаривания может приводить к введению эстрогенов, когда уровень прогестеронов в плазме повышен, поэтому увеличивается риск развития кистозной гиперплазии эндометрия и пиометры. До настоящего времени не было продемонстрировано повышения частоты заболеваемости заболеваниями матки.
Тамоксифен
Тамоксифен является антиэстрогеном, который может быть использован для предотвращения или прерывания беременности у сук, хотя точный механизм действия не известен. Он может мешать продвижению зиготы и/или имплантации зародыша. Относительно высокие дозы препарата, вводимые два раза в день внутрь во время проэструса, эструса или ранней стадии диэструса, показали себя эффективными. К часто развивающимся патологическим изменениям в репродуктивных органах суки, вызываемые тамоксифеном, относят кисты яичников и эндометриоз.
Прерывание беременности
После того как была установлена беременность, ее можно прервать либо путем нарушения гормонального фона, либо путем прямого воздействия на эмбрионы.
Суки зависят от продукции прогестерона яичникам на протяжении всей беременности. Поэтому для прерывания беременности могут быть использованы методы, которые вызывают преждевременный лютеолизис. Так как и ЛГ и пролактин оказывают лютеотрофическое действие, лечение может быть также направлено против этих гормонов, чтобы вызывать лизис желтого тела беременности и прерывание беременности.
Простагландины
При назначении простагландинов суке, они вызывают лизис желтого тела беременности и уменьшают содержание прогестерона в плазме. Желтое тело беременности сук наиболее устойчиво к простагландинам, чем у других видов, и поэтому требуется повторное лечение, чтобы достичь эффекта. Простагландины также стимулируют сокращение гладкой мускулатуры, оказывая усиливающее родовую деятельность влияние, что может быть частью механизма вызывания аборта. Влияние на гладкую мускулатуру также определяет побочные эффекты простагландинов, включая саливацию, рвоту, лихорадку, учащение дыхания, атаксию и диарею; высокие дозы могут быть летальными.
Фармакологические дозы простагландинов (ПГF-2α) могут быть использованы, чтобы вызывать лютеальную регрессию, так как продолжительность лечения более важна, чем доза. Повторное введение низких доз простагландина будет значительно снижать уровень прогестерона в плазме и провоцировать аборт, особенно, когда вводится позднее 25 дня после всплеска уровня ЛГ. Созревшее желтое тело наиболее чувствительно к влиянию простагландина, чем развивающееся желтое тело. Однако в недавних исследованиях показано, что ежедневное лечение, начинаемое через 5 дней после начала метэструса (диэструса), с использованием высоких доз простагландина может быть эффективно, хотя часто встречаются побочные эффекты.
Клопростенол может быть использован, чтобы вызвать аборт на 25 день после всплеска уровня ЛГ, когда вводится интравагинально в виде 24 часового высвобождающего пластикового приспособления. Медленное высвобождение обеспечивает длительный лютеолитический эффект и, по-видимому, уменьшает частоту возникновение побочных реакций.
Также было показано, что аналог простагландина (TPT) вызывает лютеолизис и прерывание беременности. Это средство полезно, так как требуется лишь одно введение, но оно имеет такие же побочные эффекты, что и естественные простагландины и недоступен в продаже.
Антагонисты пролактина
Антагонисты пролактина, такие как бромокриптин и карберголин, снижают уровень прогестерона в плазме, особенно, когда вводятся во время поздней лютеальной фазы.
Эти препараты являются агонистами допамина, которые ингибирует высвобождение пролактина из передней доли гипофиза. Бромокриптин менее специфичное средство и имеет тенденцию вызывать развитие побочных эффектов, особенно рвоту. Однако бромокриптин единственный продукт доступный в Объединенном Королевстве, хотя он не разрешен к использованию у собак. Карбеголин, по-видимому, более специфичный, чем бромокриптин и вызывает меньше побочных эффектов. Когда они вводятся во время середины беременности, оба препарата вызывают значительное снижение уровня прогестерона в плазме, приводя к резорбции плодов или аборту; более раннее лечение менее эффективно.
Комбинация простагландина и антагониста пролактина
Комбинация допаминового агониста каберголина и синтетического аналога простагландина ПГF2-α, клопростенола, вызывает прерывание беременности с 25 дня после всплеска уровня ЛГ. Каберголин может вводиться ежедневно внутрь, а клопростенол подкожно через день. При этой схеме частота побочных эффектов монотерапии простагландинами уменьшается, и повышается эффективность антагонистов пролактина, которые одни хорошо работают с 40 дня после всплеска уровня ЛГ. Когда суки лечатся приблизительно 9 дней, в 100 % случаев происходит резорбция плодов, и, как правило, отсутствуют побочные эффекты. Эта схема имеет многообещающее будущее, особенно если каберголин станет доступным в Объединенном Королевстве.
Антагонисты прогестерона
Мифепристон (RU486) является антагонистом прогестероновых и глюкокортикоидных рецепторов. Введение этого препарата вызывает антипрогестероновый эффект. Вслед за его введением уровень прогестерона первоначально не изменяется. Когда он вводится беременным сукам позднее 30 дней после всплеска уровня ЛГ, смерть плодов наступает в течение 5 дней лечения. Ранее введение требует более длительного периода лечения. Прерывание беременности характеризуется резорбцией плодов на ранних сроках беременности и абортом на поздних сроках беременности. Побочные эффекты не отмены при таком лечении. Похожий антагонист прогестерона (RU534) недавно появился в продаже для применения для сук во Франции.
Ингибиторы синтеза прогестерона
Эростан является гидроксистероидным ингибитором фермента дегидрогеназы-изомеразы, который предотвращает превращение прегненолона в прогестерон. Поэтому уровень прогестерона в плазме уменьшается, тогда как уровень прегненолона, который биологически неактивный, повышается. Эростан не обладает внутренней эстрогенной, андрогенной или прогестогенной активностью, и после использования последующая фертильность остается нормальной.
У сук единственная подкожная инъекции эростана в начале метэструса (диэструса) будет предотвращать или прерывать беременность, хотя на месте введения часто образуются абсцессы. Высокие дозы, вводимые внутрь 7 дней, будут успешно прерывать беременность без видимых побочных эффектов. Эростан недоступен в Объединенном Королевстве.
Агонисты и антагонисты ГЛ
Постоянное введение гонадотропин-высвобождающего гормона (гонадолиберина (ГЛ)) или агониста ГЛ вызывает обратный регулирующий эффект, который может быть использован, чтобы мешать гонадотропину поддерживать желтое тело. Это приводит к уменьшению уровня прогестерона и абортам или резорбции плодов.
Также ежедневное введение антагонистов ГЛ успешно подавляет лютеальную функцию. Антагонист ГЛ, детиреликс, назначали ежедневно, чтобы вызывать аборт или резорбцию плодов в зависимости от срока беременности. Введение на очень ранних сроках беременности неэффективно, даже когда доза повышена. Это отражает относительную независимость поддержки гонадотропином на ранних сроках беременности, и попытки преодолеть это были сделаны путем комбинирования антагонистов ГЛ с простагландинами. Эти средства считаются синергичными и могут быть полезными для прерывания беременности уже на 4 день метэструса (диэструса), хотя отмеченная степень успеха составляла только 80 %.
Кортикостероиды
У многих видов введение кортикостероидов во время беременности вызывает аборт. Для этого требуется, чтобы на момент введения глюкокортикодидов фетопланцентарное соединение продуцировало эстроген и простагландин. Единичные дозы кортикостероидов неэффективны у сук; однако, дексаметазон, вводимый два раза в день 10 дней, начиная через 30 дней после всплеска уровня ЛГ, понижает уровень прогестерона и вызывает аборт. Механизм действия не ясен, однако повторные введения и высокие дозы, обуславливают непрактичность метода, а риск развития побочных эффектов должен быть внимательно оценен, прежде чем применять эту схему.
Негормональные эмбриотоксические препараты
Несколько новейших эмбриотоксических препаратов изучено для применения у сук. Эти препараты фенилтриазола изоиндола и изоквинолона могут вводиться внутрь или в виде инъекций. Они наиболее эффективны, когда вводятся во время имплантации зародыша и часто требуется однократное введение. Одно вещество, лотрифен, медленно выделяется из депо-инъекций и может быть эффективным, когда вводиться в любое время в течение первых 15 дней после спаривания. Многие из этих средств недоступны, из-за их токсичности, включающей рвоту, диарею и потерю веса. Степень успеха составляла до 90 %. Однако неудачные случаи могут заканчиваться рождением мертворожденных или слабых щенков, которые быстро умирают. Кроме того, были отмечены различные побочные эффекты у сук, включаю лихорадку, летаргию, гнойный менингит и иммуносупрессию. Поэтому эти средства не приемлемы в клинической практике.
Заключение
Важно помнить, что большинство сук, приводимых на прием из-за подозрения на нежелательное спаривание, возможно, не будут спаренными. Поэтому повальное лечение всех сук во время ветеринарного осмотра может быть не приемлемым. Тщательное изучение анамнеза, сочетающееся с данными результатов цитологии влагалищных мазков и определения уровня прогестерона в плазме, могут выявить, какой суке подходит немедленное лечение.
В определенных случаях будет необходимо подождать до тех пор, пока можно будет поставить точный диагноз на беременность, до того как начинать лечение, тогда как в других случаях лечением выбора может стать овариогистерэктомия. В тех случаях, когда необходимо прервать беременность, должны быть учтены побочные эффекты различных препаратов, а также их эффективность. Вызывание аборта может быть приемлемым для владельцев некоторых сук, и в этих случаях может быть необходимо вызывание резорбции плодов. В настоящее время схема, которая показывает наиболее обещающие результаты – это комбинация антагонистов пролактина и простагландина, и хотя каберголин все еще недоступен в Объединенном Королевстве, вероятно, что в скором будущем это ситуация измениться.
Литература
Часть вторая
|
|
|
