11.2.2. Микробиологические методы исследования

11. 2. 2. Микробиологические методы исследования

Микробиологическое исследование проводят с целью установить этиологическую роль тех или иных микроорганизмов при наличии соответствующего клинического синдрома для подтверждения или исключения заболеваний инфекционной природы. При этом следует учитывать, что возбудителями воспалительных процессов органов репродуктивной системы могут быть как УПМ - представители транзиторного компонента нормальной микрофлоры влагалища и других биотопов, так и абсолютные патогены - возбудители ИППП. Такая связь ИППП и оппортунистических инфекций определяет необходимость комплексного подхода к микробиологической диагностике.

Правила взятия клинического материала

Необходимо соблюдать следующие требования при взятии и транспортировке биоматериала для микробиологического исследования:

• брать материал из очага инфекции (где возбудитель находится в максимальном количестве), а при невозможности выполнить это требование брать биопробы, связанные с очагом инфекции (моча при патологии почек и мочевого пузыря, отделяемое из цервикального канала при эндометрите);
• удостовериться, что пациентка не использовала местного лечения по крайней мере в течение последних 3 сут;
• брать материал до начала антимикробной терапии, а при невозможности выполнить это требование - непосредственно перед введением следующей дозы препарата (когда концентрация его становится минимальной);
• соблюдать правила асептики, т. е. не допускать контаминации забираемой пробы сопутствующей транзиторной микрофлорой;
• транспортировку в лабораторию взятого материала проводить в адекватном температурном режиме (20-37 °С), в максимально короткие сроки (не более 1-1, 5 ч); при невозможности выполнить это требование использовать транспортные среды и хранить пробы в условиях бытового холодильника (за исключением ликвора и крови);
• при подозрении на анаэробную инфекцию материал следует максимально защищать от кислорода воздуха; сразу после взятия помещать в анаэробные контейнеры или в специальные транспортные среды;
• при подозрении на гонорейную инфекцию предпочтительнее прямой посев взятого стерильной пластиковой петлей материала на плотную селективную среду; затем чашку Петри с посевом помещают в специальный пластиковый пакет с повышенным содержанием углекислого газа и отправляют в лабораторию.

NB! Отделяемое из влагалища, цервикального канала, уретры брать до проведения мануального влагалищного исследования.

Наружные половые органы, преддверие влагалища. Мазки берут стерильными ватными (дакроновыми) тампонами с патологически измененных участков; при воспалении большой железы преддверия проводят пункцию, при вскрытии абсцесса железы берут гной стерильным ватным тампоном.

Влагалище. После введения зеркала и подъемника отделяемое берут стерильным ватным тампоном из заднего свода или с патологически измененных участков слизистой оболочки; с целью культурального исследования тампон помещают в стерильную пробирку и немедленно отправляют в лабораторию или помещают взятую пробу в пробирку с транспортной средой. С целью микроскопии пробу переносят на предметное стекло, перекатывая тампон всеми сторонами по стеклу, стараясь, чтобы материал распределился равномерно, сохраняя естественное взаиморасположение всех компонентов биоценоза; мазок высушивают на воздухе, фиксируют 96% раствором этанола (2-3 капли на мазок до полного испарения), маркируют стекло и в закрытой емкости отправляют в лабораторию.

Шейка матки. После обнажения шейки матки в зеркалах влагалищную часть ее обрабатывают ватным тампоном, смоченным стерильным 0, 9% раствором натрия хлорида, затем специальную шпатель-палочку осторожно вводят в шеечный канал, вынимают, не касаясь стенок влагалища, помещают ее в пробирку с транспортной средой для проведения культурального исследования. Для выполнения микроскопии методом иммунофлюоресценции в различных модификациях, вирусологического исследования или ПЦР материал берут специальной щеточкой: на 1-2 см в глубине цервикального канала щеточку вращают 3 раза по часовой стрелке и 2 раза - против, чтобы получить клеточный соскоб, но не допуская скарификации и попадания элементов крови. Взятый материал помещают в пробирки с соответствующей транспортной средой. Для микроскопического и иммунофлюоресцентного исследования - переносят на предметное стекло.

Матка. Материал из полости матки для исследования может быть получен только при использовании шприца-аспиратора. Соблюдая правила асептики, проходят цервикальный канал и в полости матки раскрывают наружную оболочку шприца, после чего аспирируют содержимое. После этого закрывают наружную оболочку и вынимают зонд из матки.

Придатки матки. Материал из очага инфекции можно получить только при проведении диагностической пункции опухолевидных образований в малом тазу, проводимой через влагалищные своды (следует учитывать возможность контаминации пробы влагалищной микрофлорой) или при оперативном вмешательстве (гной, экссудат, биопсийный материал).

Отделяемое из уретры берут пластиковой одноразовой стерильной бактериологической петлей объемом 1 мкл или тонким дакроновым тампоном на алюминиевой проволоке. Предварительно наружное отверстие уретры следует очистить марлевым или ватным тампоном. При отсутствии видимых выделений врач может выполнить легкий массаж уретры. Тампон/петлю вводят в уретру на 1-2 см и вынимают, слегка нажимая на боковые и заднюю стенки.

Моча. После тщательного туалета наружных половых органов в стерильный контейнер собирают среднюю порцию утренней свободно выпущенной мочи в количестве 5-10 мл. Учитывая, что содержащиеся в моче микроорганизмы при комнатной температуре начинают размножаться, образец должен быть доставлен в лабораторию в течение 1-2 ч, чтобы избежать ложных результатов при количественной оценке степени бактериурии. При невозможности выполнить это требование допускают хранение пробы мочи при температуре 4 °С в холодильнике не более 12 ч. Также забор мочи может быть выполнен катетером.

Кровь. Посев крови (выявление бактериемии) необходим при подозрении на развитие синдрома системного воспаления (стойкая гипертермия, озноб, гипотермия, лейкоцитоз, признаки полиорганной дисфункции). Пробы крови берут как можно раньше от момента начала лихорадки, 2-3 раза с интервалом 30-60 мин из периферических вен верхних конечностей.