 |
Оглавление. 1. Список сокращений
|
|
|
|
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
имени М. В. ЛОМОНОСОВА
БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ
Кафедра биохимии
Хуторова Анастасия Викторовна
ОЦЕНКА НЕЙРОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ САЛИЦИЛ-КАРНОЗИНА В МОДЕЛЯХ ГЛЮКОЗО-КИСЛОРОДНОЙ ДЕПРИВАЦИИ И NMDA-ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭКСАЙТОТОКСИЧНОСТИ НА ПЕРВИЧНОЙ КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК КОРЫ БОЛЬШИХ ПОЛУШАРИЙ МОЗГА КРЫСЫ
Выпускная квалификационная работа магистра
Научный руководитель:
доктор биологических наук
Федорова Т. Н.
Москва – 2021 г.
Оглавление
1. Список сокращений……………………………………………………............... 4
2. Введение……………………………………………………………………......... 7
3. Обзор литературы
3. 1. Инсульт, причины его возникновения... …………………....... ……………9
3. 2. Ишемический инсульт, патогенез заболевания................. …..... …………10
3. 3. Антиоксидантная система клетки.............................. ……….... ………….. 16
3. 4. Антиапоптотические сигнальные каскады.. ………............... ……………19
3. 5. Проапоптотические сигнальные каскады.................. ………….... ………. 21
3. 6. Экспериментальные модели ишемического инсульта in vitro и in vivo... 24
3. 7. Терапевтические мишени при ишемическом инсульте............................. 26
3. 8. Салицил-карнозин - потенциальный антиоксидант................................... 29
4. Цель и задачи исследования............................................................................... 31
5. Материалы и методы........................................................................................... 32
5. 1. Подготовка первичной культуры клеток.................................................... 33
5. 2. Моделирование ишемии с помощью глюкозо-кислородной депривации....... …………..... ………..... ………..... ………..... ………..... …. 34
5. 3. Моделирование NMDA-индуцированной эксайтотоксичности....... ……35
5. 4. Анализ жизнеспособности (МТТ-тест)........ …... …………………………37
|
|
|
5. 5. Анализ гибели клеток…………………….. ………………………………. 38
5. 6. Вестерн-блоттинг………….. ………………………………........................ 39
5. 7. Статистическая обработка результатов....................................................... 40
6. Результаты и их обсуждение
6. 1. Влияние салицил-карнозина, салициловой кислоты, ацетилсалициловой кислоты, карнозина на жизнеспособность первичной культуры клеток коры больших полушарий мозга крыс в условиях глюкозо-кислородной депривации……............................................................................................. 42
6. 2. Влияние салицил-карнозина на киназы Akt, ERK1/2, JNKи относительное количество про- и антиапоптотических белков в первичной культуры клеток коры больших полушарий мозга крыс в условиях глюкозо-кислородной депривации............................... ………... 51
6. 3. Влияние салицил-карнозина, ацетилсалициловой кислоты, карнозина на жизнеспособность первичной культуры клеток коры больших полушарий мозга крыс в модели NMDA-индуцированной эксайтотоксичности.......................... ……….................... ………................. 73
7. Заключение.............................................. ……….................... ………................. 80
8. Выводы…………………………………………………..... ……………………81
9. Список литературы……………………………............ …….. …………………82
1. Список сокращений
АДФ - аденозиндифосфат
АМФ - аденозинмонофосфат
АСК - ацетилсалициловая кислота
АТФ - аденозинтрифосфат
АФК - активные формы кислорода
БСА - бычий сывороточный альбумин
ГКД - глюкозо-кислородная депривация
ГЭБ - гемато-энцефалический барьер
ДМСО - диметилсульфоксид
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт
ИЦСЖ - искусственная цереброспинальная жидкость
ЛДГ - лактатдегидрогеназа
MTT - 3-(4, 5-диметилтиазол-2-ил)-2, 5-дифенил-тетразолиум бромид
НАДН - никотинамидадениндинуклеотид восстановленный
НАДФН - никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный
|
|
|
НПВП - нестероидные противовоспалительные препараты
РНК - рибонуклеиновая кислота
Сал - салициловая кислота
СК - салицил-карнозин
СОД - супероксиддисмутаза
ЦНС - центральная нервная система
ЦОГ-2 - циклоокисгеназа-2
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
AIF - apoptosis inducing factor
Akt - Rac-alpha serine/threonine-protein kinase
АМРА - α -Amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid
AMPK - AMP-activated protein kinase
AP-1 - activating protein-1
Apaf-1 - apoptotic protease activating factor 1
ARE - antioxidant response element
ATF - activating transcription factor
Bad - Bcl-2-associated agonist of cell death
Bak - Bcl-2 homologous antagonist killer
Bax - Bcl-2-associated X protein
Bcl-2 - B-cell lymphoma 2
Bcl-xL - B-cell lymphoma-extra large
Bcl-xS - B-cell lymphoma-extra small
Bid - BH3 interacting-domain death agonist
Bim - Bcl-2-like protein 11
Bmf - Bcl-2-modifying factor
CREB - cAMP response element-binding protein
DISK - death-inducing signaling complex
Dp5 - death protein 5
ERK - extracellular signal-regulated kinase
FasL - first apoptosis signal ligand
FBS - fetal bovine serum
FOXO - forkhead box protein O
GSH - glutathione
HIF - hypoxia-inducible factor
Iκ B - inhibitor of nuclear factor kappa B
JNK - c-Jun N-terminal kinase
Keap1 - Kelch-like ECH-associated protein1
Ltk - leukocyte receptor tyrosine kinase
MAPK - mitogen-activated protein kinase
MCAO - middle cerebral artery occlusion
MEK, MKK - mitogen-activated protein kinase kinase
MLK - mixed lineage kinase
MMP - matrix metalloproteinase
NBM - neurobasal medium
NF-κ B - nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells
NGF - nerve growth factor
NMDA - N-methyl-D-aspartate
NOX - NADPH oxidase
Nrf2 - nuclear erythroid-2 like factor-2
Omi/HtrA2 - High-temperature requirement protein A2
p38 - protein 38
p53 - protein 53
PDGF - platelet-derived growth factor
PI3K - phosphoinositide 3-kinase
PKA - protein kinase A
PKC - protein kinase C
Puma - p53 upregulated modulator of apoptosis
PVDF - polyvinylidene fluoride
Rac - Ras-related C3 botulinum toxin substrate
Raf - rapidly accelerated fibrosarcoma
RasGRF1 - Ras protein-specific guanine nucleotide-releasing factor 1
RIPA - radioimmunoprecipitation assay
Rsk - ribosomal S6 kinase
SDS - sodium dodecyl sulfate
Smac/DAIBLO - second mitochondrion-derived activator of caspase/direct inhibitor of apoptosis-binding protein with low pI
TBST - Tris-buffered saline with 0, 1% Tween
TNF - tumor necrosis factor
TNT - tunneling nanotube
TRAIL - TNF-related apoptosis-inducing ligand
TrkA - tropomyosin receptor kinase A
xCT - cystine/glutamate antiporter
XIAP - X-linked inhibitor of apoptosis protein
|
|
|
