 |
(инфекция вирусом ящура). Резюме
|
|
|
|
Глава 3. 1. 8.
ЯЩУР
(ИНФЕКЦИЯ ВИРУСОМ ЯЩУРА)
__________________________________________________________________
РЕЗЮМЕ
Ящур является самым контагиозным заболеванием млекопитающих животных и обладает большим потенциалом в плане нанесения серьезных экономических потерь у восприимчивых парнокопытных животных. Существует семь серотипов вируса ящура, а именно, O, A, C, SAT 1, SAT 2, SAT 3 и Азия 1. Заражение вирусом одного серотипа не обеспечивает выработку иммунитета к другому серотипу. По клиническим проявлениям ящур невозможно отличить от других везикулярных заболеваний, таких как везикулярная болезнь свиней, везикулярный стоматит и везикулярная экзантема. Поэтому, лабораторная диагностика любых подозрительных случаев ящура имеет особую важность.
Типичные случаи ящура характеризуются наличием везикул на конечностях, слизистой оболочке щек, а также молочных железах у самок. Клинические признаки могут варьировать от слабых до сильно выраженных. Также могут наблюдаться смертельные случаи особенно у молодых животных. У некоторых видов животных инфекция может быть субклинической, например, у африканских буйволов (Syncerus caffer). Наиболее предпочитаемой тканью для диагностирования является эпителий из неразорвавшихся или только что разорвавшихся везикул или афтозная жидкость. Если их получение невозможно, в качестве альтернативного источника вируса берутся пробы крови и/или образцы жидкости из глотки и пищевода, отбираемой с помощью пищеводно-глоточного зонда у жвачных животных или мазки из зева у свиней. Можно использовать ткань миокарда или кровь, отобранные у павших животных, но все же, предпочтение отдается везикулам, если таковые имеются.
|
|
|
Крайне важно, чтобы транспортировка образцов, отобранных у подозрительных животных, осуществлялась безопасным способом и в соответствии с международными нормами. Их нужно отправлять исключительно в имеющие разрешение лаборатории.
Диагностика ящура осуществляется посредством выделения вируса или демонстрации антигена или нуклеиновой кислоты вируса ящура в образцах тканей или жидкости. Обнаружение вирус-специфических антител также может быть использовано для диагностики, а наличие антител к неструктурным белкам (NSPs) может использоваться в качестве индикатора наличия инфекции, независимо от статуса по вакцинации.
Идентификация возбудителя болезни: Для постановки положительного диагноза достаточно обнаружения антигена или нуклеиновой кислоты вируса ящура. В связи с высокой контагиозностью и экономической важностью ящура, лабораторную диагностику и идентификацию серотипа вируса необходимо производить в лабораториях, с соответствующим уровнем биозащиты, определенным по результатам анализа риска в соответствии с Главой 1. 1. 4 Биобезопасность и биозащита: Стандарт для управления биологическими рисками в ветеринарной лаборатории и виварии.
Для обнаружения антигенов вируса ящура и серотипирования можно использовать иммуноферментный анализ (ИФА). Устройства бокового потока (LFD) становятся все более доступными и также могут использоваться для обнаружения антигенов вируса ящура. Во многих лабораториях ИФА заменил реакцию связывания комплемента (РСК), так как он обладает большей специфичностью и чувствительностью и не подвержен влиянию про- и анти- комплементарных факторов. Если количество пробы недостаточно, или диагноз остается неопределенным, материалы образца могут быть протестированы с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и/или посредством процедуры выделения вируса с использованием чувствительной культуры клеток для амплификации любой нуклеиновой кислоты или живого вируса, которые могут присутствовать в материале образца. Желательно, чтобы это была в первую очередь культура клеток щитовидной железы крупного рогатого скота (теленка), но можно также использовать клетки почек свиней, ягнят и телят, или клеточные линии с аналогичной чувствительностью. При полном проявлении цитопатогенного действия (ЦПД) в культурах, собранные жидкости можно исследовать на наличие вируса ящура, используя ИФА, РСК или ОТ-ПЦР.
|
|
|
Серологические тесты: Выявление специфических антител к структурным белкам у невакцинированных животных указывает на предшествующую инфекцию вирусом ящура. Это особенно полезно у животных с легкой формой болезни или когда нет возможности собрать эпителиальные ткани. Тесты на наличие антител к некоторым неструктурным белкам (NSPs) вируса ящура полезны для получения доказательств наличия репликации вируса в хозяине в прошлом или в настоящем, независимо от статуса по вакцинации. Неструктурные белки, в отличие от структурных белков, являются высоко консервативными и, поэтому, не являются серотип-специфическими, и, как следствие, обнаружение таких антител не является серотип-лимитированным.
Реакции нейтрализации вируса (VNT) и ИФА для обнаружения антител к структурным белкам используются в качестве серотип-специфических серологических тестов. Реакции нейтрализации вируса зависят от культур тканей и, поэтому, наиболее подвержены вариабельности, чем иммуноферментные анализы (ИФА); к тому же они медленнее и подвержены контаминации. Преимущество иммуноферментного анализа для обнаружения антител заключается в том, что он быстрее и не зависит от культуры клеток. Иммуноферментный анализ можно проводить с инактивированными или рекомбинантными антигенами, вследствие чего, требования к помещениям с системой биозащиты менее строгие.
Требования к вакцинам: Впродаже имеютсяинактивированные противовирусные вакцины с различным составом. В основном, вирус используют для заражения суспензии или монослойной клеточной культуры, а получившийся в результате препарат очищают, инактивируют с помощью этиленимина и концентрируют. Для составления вакцины антиген обычно смешивают с масляным или водным адъювантом. Многие вакцины против ящура поливалентны в целях предоставления защиты от различных серотипов, или для обеспечения соответствия антигенному разнообразию, которое может встречаться в конкретной полевой ситуации.
|
|
|
Необходимо проводить исследование готовой вакцины на наличие остатков живого вируса. Лучшие результаты получаются при использовании in-vitro тестов на концентрированных инактивированных вирусных препаратах перед составлением вакцины, а отсутствие живого вируса впоследствии подтверждается во время проведения in-vivo и/или in-vitro тестов на готовом продукте. Также проводят тестирование посредством контрольного заражения на вакцинированном крупном
рогатом скоте (КРС), для определения 50% протективной дозы (ПД50) или на наличие защиты от системного заражения конечностей (PGP), хотя серологический тест считается удовлетворительным, если установлена достоверная корреляция между защитой и специфическим гуморальным иммунным ответом.
Предприятия по производству противоящурной вакцины должны иметь соответствующий уровень биозащиты, определенный по результатам анализа риска в соответствии с главой 1. 1. 4.
Диагностические и эталонные реагенты можно получить в Референтных лабораториях МЭБ по ящуру или во Всемирной референтной лаборатории ФАО по ящуру (Пербрайтский институт, СК (где ФАО – Продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН)).
|
|
|
