 |
1. Контроль посевного вируса. 1.1. Характеристики посевного вируса. 1.2. Метод культивирования. 1.3. Валидация в качестве вакцинного штамма
|
|
|
|
1. Контроль посевного вируса
1. 1. Характеристики посевного вируса
Отбор исходных посевных вирусов в идеале следует производить на основании простоты их роста в клеточной культуре, урожая вируса, антигенной стабильности на производственном уровне и широкого антигенного спектра. Изоляты для получения исходных посевных вирусов (MSVs) должны быть охарактеризованы и распространяться предпочтительно Референтными лабораториями МЭБ по ящуру; их следует выбирать в соответствии с эпизоотологической важностью каждого штамма.
Конкретный источник изолята должен быть зарегистрирован и включать такую информацию как местоположение, вид животного и тип материала, из которого был получен вирус. Для идентификации штамма вируса ящура необходимо использовать уникальную номенклатуру. В соответствии с Главой 1. 1. 8 следует зарегистрировать историю пассированиявируса in-vitro и подробную информацию относительно его составляющих. Уровень пассирования посевного вируса должен быть минимальным во избежание антигенных и генетических изменений.
1. 2. Метод культивирования
Методы культивирования должны соответствовать положениям главы 1. 1. 8. Если нет подходящего стабильного штамма вируса, новые вакцинные штаммы получают посредством создания исходных посевных вирусов из местных полевых
изолятов, адаптируя их к росту в суспензии или в монослойных клетках посредством серийных пассажей. Для того чтобы устранить риск контаминации вирусов с липидной оболочкой, рекомендуется подвергать предполагаемые исходные посевные вирусы валидированной обработке органическим растворителем до или во время адаптации.
|
|
|
1. 3. Валидация в качестве вакцинного штамма
Исходные посевные вирусы (MSVs) должны быть хорошо охарактеризованы антигенно и генетически и признаны чистыми и свободными от всех посторонних веществ в соответствии с Главой 1. 1. 9 Тесты на стерильность и свободу от контаминации биологических материалов, предназначенных для ветеринарного использования и внесены в список соответствующими лицензирующими органами власти. Должна быть установлена гомология с исходными кандидатными изолятами и доказана эффективность против циркулирующих штаммов, на основе которых они были разработаны. Зачастую это включает в себя использование ряда методов, при этом наиболее достоверными являются анализы степени защиты in-vivo. Альтернативно, также можно использовать тесты in-vitro (предпочтительно реакцию нейтрализации вируса), для проведения которых необходимо наличие пост-вакцинальных сывороток крови против этих исходных посевных вирусов (см. раздел D этой Главы).
Посевные вирусы могут храниться при низкой температуре (например, -70°С) или в лиофилизированном состоянии. Рабочие посевные вирусы могут быть размножены с помощью одного или нескольких пассажей исходного посевного вируса и использованы для инфицирования конечной клеточной культуры.
Следует уделять внимание минимизации риска передачи возбудителей трансмиссивных губкообразных энцефалопатий (ТГЭ) посредством гарантирования того, что материалы, представляющие риск в отношении ТГЭ, не используются в качестве источника вируса или в любой среде, используемой в размножении вируса.
1. 4. Процедура временного утверждения нового исходного посевного вируса, используемая в чрезвычайной ситуации, и последующий выпуск составленных вакцин
В случае заноса в регион нового штамма, защита против которого не обеспечивается существующими вакцинными штаммами, возможно, будет необходимо получить новый вакцинный штамм из репрезентативного полевого изолята. Перед утверждением нового исходного посевного вируса, следует продемонстрировать полное соответствие релевантным руководящим положениям для доказательства свободы от всех посторонних агентов, включенных в списки соответствующих лицензирующих органов власти, используя как общие, так и специфичные тесты, и установления гомологии с оригинальными кандидатными изолятами. Может потребоваться достаточно много времени, чтобы получить специфическую антисыворотку, необходимую для нейтрализации нового штамма, чтобы в дальнейшем использовать ее в общих тестах по обнаружению посторонних агентов, и для проведения других специфических тестов, которые требуют специализированных методов. Поэтому, в чрезвычайных ситуациях, когда недостаточно времени для осуществления полного тестирования исходных посевных вирусов, временное утверждение
|
|
|
нового штамма должно производиться на основании результатов анализа риска возможной контаминации антигена, полученного из нового исходного посевного вируса, посторонними агентами. При такой оценке риска следует учитывать, что инактивация вируса производится химическим инактивантом с кинетикой первого порядка. Дальнейшее подтверждение предусматривается требованием в отношении мониторинга и регистрации кинетики инактивации для каждой производственной партии.
|
|
|
