 |
Задача 85. Материал: кровь, моча, СМЖ, сыворотка. На 1-ой неделе заболевания – кровь. В период разгара – моча, ликвор.
|
|
|
|
Задача 85
У двух подростков через 10 дней после купания в небольшом озере появились головная и мышечная боль, диспептические явления, лихорадка, желтуха, боль в области поясницы. Врач поставил предположительный диагноз «лептоспироз».
Какой материал для исследования и какие методы диагностики используют для подтверждения диагноза?
Ответ:
Материал: кровь, моча, СМЖ, сыворотка. На 1-ой неделе заболевания – кровь. В период разгара – моча, ликвор.
Методы:
• бактериоскопический – окраска по Романовскому-Гимзе, темнопольная, фазово-контрастная микроскопия.; • серологический (реакция агглютинации- лизиса, микроагглютинации с эталонными культурами лептоспир, ИФА) Обнаружение Ат; • биологический – проба на морских свинках; • молекулярно-генетический – ПЦР.
Задача 86
Через 2 недели после купания в пруду, расположенном недалеко от свинофермы, у Н. появились симптомы желтухи. После обследования в поликлинике был поставлен диагноз «лептоспироз». При бактериоскопическом исследовании мочи были обнаружены лептоспиры. Опишите их морфологию.
Какие методы микроскопии были использованы. Какие методы окраски применяют для обнаружения лептоспир?
Ответ:
1) Бактерии спиралевидной формы с мелкими первичными завитками и крупными вторичными в форме букв C, S, подвижные. Спор, капсул не образуют.
2) Бактериоскопический метод– окраска по Романовскому-Гимзе, темнопольная, фазово-контрастная микроскопия.
3) Метод окраски по Романовскому-Гимзе – окрашиваются в розовый цвет.
Задача 87
Кровь больного с диагнозом «лептоспироз? » посеяли на жидкую сывороточную среду.
Через какое время и каким образом проявится рост лептоспир на этой среде?
|
|
|
Ответ:
1) Для проверки на стерильность среду выдерживают при 37°С в течение 3-5 суток.
2) Особенность роста на жидкой питательной среде – отсутствие помутнения, и наличие роста определяют микроскопией в темном поле.
Задача 88
В серологическую лабораторию доставлена кровь больного с диагнозом «лептоспироз? ». Для постановки реакции агглютинации-лизиса для выявления
антител к возбудителю лептоспироза были приготовлены одинаковые разведения сыворотки крови в 13 рядах пробирок.
Почему необходимо именно такое количество рядов пробирок?
Ответ:
Возбудители лептоспироза имеют сложную антигенную структуру. Таксономическим критерием для лептоспир служит антигенный состав. Основной таксон — серовар. Серо-вары объединены в серогруппы (насчитывается более 25 серогрупп). В качестве антигенов в реакции агглютинации-лизиса используют живые культуры лептоспир различных серо-логических групп.
*Республиканские лаборатории ставят реакцию с лептоспирами 13 серологических групп: Icterohaemorrhagiae, Javanica, Canicola, Pyrogenes, Cynoptery, Autumnalis, Pomona, Grippotyphosa, Hebdomadis, Tarassovi, Bataviae, Australis, Ballum.
Задача 89
При микроскопическом исследовании отделяемого язвы, расположенной в ротовой полости больного, обнаружены тонкие извитые нити, имеющие равномерные завитки правильной формы.
1. Можно ли утверждать, что обнаружен возбудитель сифилиса?
2. Какие методы лабораторной диагностики необходимо провести, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз?
Ответ:
1. Нет, нельзя, так как в ротовой полости имеются непатогенные трепонемы. Необхо-димо провести микробиологическую диагностику.
2. - Бактериоскопический – микроскопия в темном поле, серебрение по Морозову, по Романовскому-Гимзе
- Серологические (с 4 недели)
Отборочные неспецифические тесты с кардиолипиновым Аг: реакция микропреципи-тации, Вассермана (RW)
|
|
|
Специфические потверждающие: РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем), РИФ, РНГА
*из методички
Методы:
Бактериоскопические:
1. Раздавленная (висячая) капля в темном поле.
Бледная спирохета выглядит как нежная спираль серебристого цвета, имеет 8-14 за-витков. Движения её плавные, маятникообразные, сгибательные.
2. Серебрение по Морозову.
3. Окраска по Романовскому-Гимзе.
4. Иммунологические методы: реакция иммунофлюоресценции.
Молекулярно-генетический метод. ПЦР (определение ДНК возбудителя в содержи-мом шанкра, пустул, сифилид).
Серологические методы
Неспецифические серологические реакции с кардиолипиновым антигеном (экстракт из сердца быка):
– скрининг-тест: реакция микропреципитации с плазмой крови (RPR - rapid plasma reagin) и с инактивированной сывороткой (VDRL - venereal diseases researches laboratory);
– реакция Вассермана (RW) ставилась с двумя Аг: трепонемным и кардиолипиновым (экстракт из сердца быка).
Специфические (трепонемные) реакции. При добавлении к сыворотке (плазме), лик-вору больного трепонемного антигена в виде:
1. Живой или фиксированной T. pallidum
– РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем);
– реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
Специфические серологические реакции:
2. С антигеном из разрушенной ультразвуком T. pallidum, адсорбированного на эрит-роцитах реакция непрямой гемагглютинации (РНГА).
• С рекомбинантным или биосинтетическим антигеном:
– ИФА – иммуноферментный анализ;
– иммуноблотинг;
– иммуночипы (технология на белковых микрочипах);
– иммухроматографический анализ;
– иммунохемилюминесцентный анализ.
|
|
|
